目的:通过观察肾脑复元汤(ShenNaoFuYuan decoction,SNFYD)含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Derived Stem Cells,BMSCs)的增殖、迁移、分化的作用,及其对SDF-1/CXCR4细胞因子表达的影响,探讨SNFYD通过诱导内源性BMSC动员、增殖、分化以治疗缺血性中风的可能机制,为阐明其临床疗效提供实验依据。方法:1、BMSCs的获取与鉴定:严格无菌操作下获取并暴露标准SD大鼠的骨髓腔,DMEM-HG反复冲洗、吹打后离心,收集细胞,置于加入了10%FBS的双抗DMEM-HG培养基中传代培养,使用流式细胞术鉴定培养得到的大鼠骨髓间充质干细胞。2、SNFYD含药血清培养液对BMSCs进行培养、传代:使用合格的SD大鼠制备SNFYD的含药血清,以不同浓度的含药血清配制培养液,并设普通培养液与空白血清为正常对照组、空白对照组,加入培养基中培养BMSCs,进行对比分析。3、检测相关数据:电镜下观察BMSCs形态、CCK8法检测BMSCs的增殖能力、NSE免疫组化法测定分化能力、Transwell法检测迁移能力,并使用Western blot法检测CXCR4以及SDF-1分子蛋白表达情况。结果:与对照组相比较,含药血清培养液组的BMSCs数量明显增多,形态更接近梭形及成纤维细胞样结构,扩增能力增强,迁移数量更多,NSE表达率增加,SDF-1/CXCR4细胞因子表达增高,且15%浓度SNFYD含药血清的效果更优。以上结果提示SNFYD含药血清能够增强骨髓间充质干细胞的增殖能力、迁移能力,并诱导其向神经元细胞的分化,这些作用在一定的SNFYD含药血清浓度范围内具有剂量依赖性,此效应可能与其上调SDF-1及CXCR4的表达相关。结论:1、SNFYD含药血清可明显影响BMSCs的生理过程,主要体现在加快其成形、增殖,促进其向神经样细胞分化,增强迁移能力等。2、使用SNFYD含药血清培养的细胞SDF-1/CXCR4表达增加,目前已明确SDF-1/CXCR4信号通路有促进脑坏死区域血管再生及脑保护的作用,SNFYD对BMSCs的上述作用可能与激活该细胞通路有关。3、目前SNFYD的含药血清细胞实验支持“肾生髓通脑”的理论,后续应基于这一理论设计动物实验,验证SNFYD在体内动员内源性BMSCs的作用及其效应,进一步完善“肾生髓通脑”理论的实验基础。