论文部分内容阅读
目的 研究2,3-吲哚醌对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的抗肿瘤作用。 方法 体外培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞株,MTT法检测加药细胞存活率;流式细胞仪检测2,3-吲哚醌对SH-SY5Y细胞周期分布的影响;RT-PCR检测加药后抑制凋亡基因bcl-2、凋亡基因bax和血管生长因子VEGFmRNA表达水平的变化;免疫细胞化学方法检测2,3-吲哚醌对SH-SY5Y细胞天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶caspase-3的影响。 结果 2,3-吲哚醌能显著抑制SH-SY5Y细胞增殖,加药后48小时各组SH-SY5Y细胞MTT代谢率的统计结果显示:加药各组的MTT代谢率明显低于正常对照组,与正常对照组比较有统计学意义(P<0.05);流式细胞检测加药48小时后细胞周期阻滞于G0/G1期。RT-PCR结果显示2,3-吲哚醌能下调SH-SY5Y细胞bcl-2mRNA和VEGFmRNA的表达,但对baxmRNA表达无影响。免疫细胞化学分析表明caspase-3蛋白随着2,3-吲哚醌浓度的升高其表达逐渐增加。 结论 本研究证实,2,3-吲哚醌对SH-SY5Y细胞具有抗肿瘤作用,其作用主要通过诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖和肿瘤血管形成以及改变细胞周期而实现的。本文应用人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞作为靶细胞,探讨2,3-吲哚醌对其的抗肿瘤作用及可能的作用机制。 实验证明,2,3-吲哚醌能够促进SH-SY5Y细胞凋亡,抑制其增殖及肿瘤血管的形成。本课题从细胞水平、mRNA水平及蛋白水平上探讨了2,3-吲哚醌抗肿瘤的可能机制,从而得出在细胞水平上2,3-吲哚醌可成功应用于人神经母细胞瘤治疗的结论,为其临床应用提供理论基础。同时在我们研究2,3-吲哚醌抗肿瘤作用机制的过程中,进一步的揭示了在应用2,3-吲哚醌治疗人神经母细胞瘤中的有效的靶位点。综上所述,我们的研究证明了应用2,3-吲哚醌可以有效抑制肿瘤细胞的增殖,从而为肿瘤治疗提供了新的思路。而且2,3-吲哚醌能够成功应用于体外培养的人神经母细胞瘤细胞系作为治疗肿瘤的临床前试验,极有可能成为未来治疗肿瘤的新兴药物。