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卵巢功能早衰(Prematurc Ovarian Failure,POF)系多种病因所致的卵巢功能衰竭,发生于青春发育后至40岁以前的妇女,以闭经为主要临床表现,并伴有血清雌二醇水平下降和促性腺激素水平上升,其发病率占全部妇女的1-3%。近年来卵巢早衰有发病增多,且发病年龄进一步年轻化的趋势。近十年来对POF的研究,是当今生殖医学和生殖健康研究的热点和难点。当妇女卵巢功能出现不同程度衰退后,心血管等疾病的发生率会明显增加。血液流变学的检测对于防治心血管疾病具有重要的意义。到目前为止还没有确切有效的方法能恢复卵巢的功能,西医治疗近期疗效明显,能缓解大部分困扰患者的突出症状,但不能排除其远期致癌危险,且停药后复发率高,不易为广大患者接受。而中医丰富的经验和安全的方药,在卵巢早衰的治疗中占有重要地位。导师张淑杰教授从传统医学出发认为本病的病因病机是肾虚血亏,自拟“养血补肾方(YXBSF)”治疗POF,在临床上取得了良好的效果。本实验从多层次、多角度探讨此方对于卵巢早衰大鼠所引起的血液流变学产生的影响,为该药的临床应用提供可靠的实验依据,为卵巢早衰患者中医中药的临床复方用药治疗和预防提供新的思路和方法。
目的:探讨中药养血补肾复方对卵巢早衰大鼠引起血流变的影响
方法:本实验选60只健康雌性、动情周期规律的SD大鼠,暂将大鼠随机分为两组,空白对照组15只,模型组45只。用自身免疫法建立卵巢早衰的大鼠模型,造模成功两周后处死空白对照组及模型组各5只大鼠,再将模型组40只大鼠随机分为模型空白组、中药高剂量组、中药低剂量组、西药组,每组各10只,中药高、低剂量组分别给予养血补肾中药不同剂量灌胃,西药组给予己烯雌酚水溶液灌胃,空白对照组给予正常颗粒饲料饮食,造模期间给予模型组高脂饲料自由饮食,诱导大鼠形成血流变异常。连续治疗3个月,分别于造模前后及治疗前后观察各组大鼠的一般情况、动情周期、血清中性激素水平、卵巢组织学改变。
结果:
1一般状态:造模前大鼠活动频繁,毛发光泽,食欲旺盛,对刺激反应灵敏。造模后活动减少,体毛枯疏无光泽,对刺激反应淡漠,甚至出现肛周污染。治疗后各组大鼠身体情况和精神状态明显好转。
2阴道脱落细胞涂片:造模前大鼠有完整的动情周期(4-5天/次),造模后动情周期紊乱,动情间期延长。治疗后各组大鼠的动情周期均趋于正常,组间无明显差异。
3卵巢形态学改变:大鼠造模前各期卵泡形态、数量正常,生长活跃,黄体数目多,闭锁卵泡较少。造模后,卵巢体积缩小,卵巢中生长卵泡和成熟卵泡数明显减少,黄体数目明显减少甚至无黄体,闭锁卵泡增多。治疗3个月后,三个组均可见不同程度的恢复,各级卵泡形态、数量接近正常,黄体数目增多,发育良好。
4血清FSH、LH和E2:造模后,模型组大鼠血清中的FSH较空白对照组有明显升高(P<0.01);LH也有明显升高(P<0.05);E2含量较造模前有明显下降(P<0.01)。
治疗后,高剂量组大鼠的FSH有明显下降(P<0.01);中药低剂量组和西药组FSH均有明显降低(P<0.05)。中药高剂量组和西药组大鼠的LH均较治疗前明显下降(P<0.05);中药低剂量组的LH较造模前也有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。各组大鼠的E2较治疗前均明显升高,西药组在统计学上存在极其显著性差异(P<0.01),中药高剂量和低剂量组均存在统计学意义(P<0.05)。各组组间比较并无显著性差异(P>0.05)。
5血液流变学指标:造模后,模型组的全血粘度高切变率(200s-1)、全血高切相对粘度和纤维蛋白原均较空白对照组明显增高(P<0.01);全血粘度中切变率(30s-1)和全血低切相对粘度也较空白组明显增高,但统计学上不存在显著性差异(P>0.05);全血粘度低切变率(5s-1)和血浆粘度较空白对照组明显增高(P<0.05)。
治疗后,中药高剂量组的全血粘度高切变率和中切变率相比模型组,都出现明显下降(P<0.05);中药低剂量组和西药组的全血高切和中切出现下降,但无统计学意义(P>0.05)。中药高、低剂量组的全血粘度低切变率明显降低(P<0.05);西药组也显著下降,差异存在极其显著性意义(P<0.01)。中药高、低剂量组和西药组的血浆粘度较模型组显著下降(P<0.01)。中药高剂量组和西药组的纤维蛋白原显著下降(P<0.01);中药低剂量组也出现下降,但无统计学意义(P>0.05)。中药高剂量组的全血高切相对粘度较治疗前下降(P<0.05);中药低剂量组和西药组也出现下降,但差异不存在统计学意义(P>0.05)。中药高、低剂量组和西药组的全血低切相对粘度较模型组均有所降低,但无统计学意义(P>0.05)。
6卵巢指数:造模后,模型组的卵巢指数较空白对照组明显降低,统计学上有极其显著性差异(P<0.01)。治疗后,中药高剂量组和西药组与模型组比较,卵巢指数有明显升高(P<0.05)。中药低剂量组的卵巢指数较模型组升高不明显,无统计学意义(P>0.05)。中药高剂量组和西药组相比,不存在显著性差异(P>0.05)。
结论:
1卵巢功能的降低,组织病理损伤等证实了自身免疫性卵巢功能衰退之动物模型建立成功。
2通过大鼠卵巢组织学改变表明养血补肾方能够促进POF模型大鼠卵泡生长,改善卵巢功能。
3养血补肾方能够明显改善POF大鼠血清性激素水平,降低FSH、LH水平,使E2水平显著上升。
4养血补肾方能够显著降低POF大鼠的血液流变学主要指标,降低血液粘度,改善微循环状态,对于心脑血管疾病的预防具有重要的临床意义。