目的:确证血液特异性mRNA分子存在人群多态性,并可利用这种多态性进行混合斑个体识别。方法:本课题利用复合扩增技术(multiplex PCR)和单碱基延伸技术(SNaPshot)对血液特异性mRNA分子上的SNP位点进行检测。构建针对5个血液特异性基因的16个SNP位点的检测试剂盒方法如下:(1)通过文献寻找血液特异性mRNA分子,同时利用NCBI的dbSNP数据库寻找这些基因上的SNP位点。(2)对筛选出的SNP位点利用Primer3软件设计引物。(3)对每对设计好的引物进行引物特异性和体液特异性检测。(4)将所有引物进行复合扩增,并调整复合扩增体系。(5)利用SNaPshot技术检测16个血液特异性SNP位点,得出分型结果。(6)对构建好的体系进行应用性验证并计算法医学参数,包括人群多态性,和对混合斑检测能力的验证。结果:1、成功构建了基于毛细管电泳平台(CE)利用SNaPshot技术检测16个血液特异性SNP位点的检测试剂盒。2、对山西人群进行多态性统计,这一体系的个体识别能力达到0.99929。3、利用该检测体系对混合斑进行分析,在进行血液供者占比为1%的极度不平衡混合斑检测时,可获得完整的血液供者分型,而且不受主要供者影响。在进行多人多种体液混合斑检测时,将血液与另外3种非血液体液混合(血液占比1%)。也可获得血液供者的完整分型,而不受其他供者影响。结论:我们提出了一种新的结合复合扩增技术和SNaPshot技术检测混合斑的方法检测血液特异性mRNA多态性,并成功利用这种方法对复杂斑进行分析。