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生物体在长期进化过程中形成了非特异性的天然免疫系统,对入侵病原体的检测及随后特异性免疫的启动都是至关重要的,在机体抗感染的过程中发挥重要的防御功能。模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)特异性的识别包括病毒在内的病原体保守组分,招募特异的接头蛋白,引起下游一系列信号级联反应,诱导抗病毒防御,使宿主免受感染。视黄酸诱导基因I样家族受体(retinoic acid-inducible gene I(RIG-I)-like receptors,RLRs),是细胞质内模式识别受体,当病毒入侵机体,RIG-I样受体识别RNA病毒并激活,通过其N端caspase募集结构域(caspase recruitment domain,CARD)招募重要的病毒诱导信号接头蛋白VISA(virus-induced signaling adapter,也称MAVS,IPS-1或Cardif),VISA蛋白在线粒体膜促进形成VISA抗病毒信号复合物,向下游传递信号,促使转录因子IRF3/7和NF-κB激活并进入细胞核,启动干扰素和细胞因子迅速表达以抵抗病毒。VISA是线粒体中发现的第一个与先天免疫相关的蛋白质,与过氧化物酶体、内质网及自噬体都有关联,不仅在抗病毒与炎症途径发挥重要作用,也参与细胞凋亡和代谢功能。但是,VISA作为线粒体蛋白如何衔接参与调节RLR-VISA抗病毒信号通路还需要进一步阐明。基于上述考虑,我们以人VISA全长为诱饵,应用酵母双杂交系统从293T细胞c DNA文库中筛选出VISA的相互作用蛋白,得到50个阳性单克隆;通过测序、序列比对与表达框架分析,以及蛋白功能预测分析,确定4个候选蛋白。利用基因克隆技术成功将4个候选基因全长构建在哺乳动物表达载体(p RK5-Flag)上;通过免疫共沉淀实验验证出3个候选基因(HAUS8(#13)、#1、#46)能与VISA相互作用;选取其中的HAUS8利用免疫共沉淀、双荧光素酶报告基因系统以及RNA干扰实验进行抗病毒功能及机理研究。结果发现在RLR-VISA信号通路激活时,HAUS8除与VISA相互作用外,还与关键信号通路分子RIG-I、TBK1也有相互作用。过表达的HAUS8能激活NF-кB,IRF3和IFN-β的活性,正调控由Se V介导的RLR-VISA信号通路。并且,敲减(knockdown)HAUS8抑制NF-κB、IRF3和IFN-β的活性,负调节由Se V诱导的RLR-VISA信号通路。并阐明HAUS8是通过靶定VISA复合体能,促进VISA、RIG-I和TBK1的泛素化,进而激活下游信号通路。HAUS8是微管相关蛋白,对维持纺锤体的完整性和染色体稳定性具有重要的作用。而通过我们的研究表明,HAUS8还可以通过激活VISA复合体正调控RLR-VISA抗病毒信号通路。HAUS8作为一个新的参与RLR-VISA抗病毒信号通路的细胞骨架相关蛋白,为细胞骨架参与RLR-VISA通路提供了一种新的的调节机制。