目的：通过给小鼠腹腔注射不同浓度乙醇，建立一个早期的大量饮酒的动物模型，运用电镜和光镜技术观察心肌细胞的形态学及超微结构的变化，用酶细胞化学染色方法观察心肌细胞细胞色素C氧化酶的活性变化，采用免疫组织化学方法观察酒精对细胞凋亡及凋亡相关基因BCL-2和BAX表达的影响，研究酒精对心脏毒性作用的机理。 方法：将60只健康雄性昆明种小白鼠随机分为4组：酒精Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组和对照组，分别给予10％、20％、30％浓度酒精和生理盐水腹腔注射，每日一次，连续处理30天后取材。部分标本制成石蜡切片，经HE染色，光镜下观察酒精对心肌细胞形态学影响；经核固红-结晶紫染色对心肌细胞凋亡情况进行定量分析；用免疫组织化学的方法显示酒精对心肌细胞凋亡相关基因BCL-2和BAX的表达情况，并利用图像分析技术进行定量分析。部分标本制备透射电镜标本，电镜下观察酒精对心肌细胞超微结构的影响。其余标本置于恒冷箱切片机内，分别切15μm及40μm厚冰冻切片，细胞色素C氧化酶染色，光镜下观察酶活性变化，并利用图像分析技术进行定量分析；40μm厚冰冻切片，孵育后制作电镜标本，透射电镜下观察心肌细胞线粒体上细胞色素C氧化酶的活性变化。 结果：1、形态学观察显示：酒精注射后各组心肌细胞HE染色未见明显异常。透射电镜下，实验各组肌原纤维排列紊乱，出现空泡，肌丝溶解，线粒体肿胀，大小不一，嵴断裂甚至融合消失，细胞核形状不规则，核膜厚薄不均，部分染色质凝聚、边集，于核膜下呈斑块状，且随着酒精浓度增加，超微结构的改变越明显。2、核固红-结晶紫染色观察及固缩细胞核计数结果显示：实验组细胞核有的被染成蓝紫色，染色质凝聚成块状，有的细胞核固缩。高倍镜下计数显示实验各组异常的细胞核明显多于对照组(P＜0.01)，且随着酒精浓度增加，固缩核细胞数逐渐增加。3、免疫组织化学染色观察与图象分析结果显示：实验各组中BCL-2表达比对照组明显减弱(P＜0.01)，着色浅，且分布不均；相反，实验各组BAX表达比对照组明显增强(P＜0.01)，染色加深，可见粗大颗粒。4、细胞色素C氧化酶染色观察：实验各组与对照组比较心肌细胞酶活性减弱，颗粒染色深浅不一，分布不均(P＜0.01)，且中文摘要与酒精浓度呈正相关。电镜下，细胞色素C氧化酶定位于线粒体内膜和峭上，实验·各组可见线粒体峭电子密度降低，酶活性减弱。 结论:l、心肌组织结构的改变与酒精的摄入量成正相关，摄入量较少时，光镜和电镜观察均未出现明显的心肌细胞的异常变化，但随着摄入量的增大，心肌细胞的超微结构即发生异常改变，且随着浓度的增加，异常更加显著。当饮酒继续，结构上的损伤会进一步加剧。结构的改变与心肌功能异常密切相关，当各种结构损伤达到一定程度时必然会出现心肌功能的改变。2、心肌细胞凋亡在酒精对心肌影响的发生机制上发挥一定的作用，随着酒精浓度的增加，心肌细胞的凋亡征象愈加明显，固缩核细胞数逐渐增加，我们推测酒精可能引起心肌细胞凋亡。3、长期大量饮酒能减弱线粒体的功能，改变其结构;而当心肌细胞发生凋亡时，线粒体结构和功能也可发生改变，可以推断出线粒体也参与了酒精引起心肌细胞凋亡的过程。4、酒精引起的心肌细胞凋亡与凋亡相关基因Bcl一2和Bax的异常表达有关，二者在细胞凋亡中是相互拮抗的关系，酒精使心肌细胞Bd一2的表达减弱，而Bax的表达增强。5、酒精可以减弱线粒体上Cox的活性，使线粒体功能发生改变，致心肌有氧代谢低下，最终将导致心肌细胞结构和功能的改变。