研究目的： 1．运用中间丝蛋白Vim标记的胚胎视网膜组织，构建Mnller细胞在视网膜发育过程中的迁移变化，同时了解视网膜不同胚胎发育时期各个层次细胞的演变。 2．运用蛋白质组学技术，建立正常成体视网膜组织与2个月月龄婴儿视网膜组织的二维凝胶图谱，进行质谱分析，比较二者表达的差异。 研究方法： 1．收集25例8～39周胎龄的胎儿眼球标本，5例正常成人眼球标本，进行组织切片，中间丝蛋白Vim抗体孵育，通过常规组织学染色、免疫组织化学和免疫荧光染色，标记不同时期的视网膜组织，普通光镜及激光共聚焦显微镜观察。 2．收集正常成体与2个月月龄婴儿视网膜组织，处理蛋白质样品，二维凝胶电泳，进行凝胶图像扫描分析，选择明显蛋白差异点进行质谱分析。 研究结果： 1．成功再现了视网膜胚胎发育的关键时期(25WG-28WG)，Müller细胞作为视网膜的主体骨架结构的形态学演变。人胚8周原始神经母细胞出现’Vim阳性表达；15周在神经节细胞层部分细胞发出杆状阳性突起；19周杆状突起附着于内界膜呈锥状。25～28周Vim在人胚视网膜Müller细胞上的表达上调，25周在视网膜神经节细胞层、内丛状层和内核层出现了长丝状阳性表达；28周附着于内界膜的锥状突起在神经节细胞层部位，与长丝状的阳性表达突起交错排列，部分阳性突起由附着点的内界膜直达外界膜，贯穿视网膜大部分区域，外界膜亦呈阳性反应。 2．正常成体视网膜组织与2个月月龄婴儿的视网膜组织的二维凝胶图谱分别发现735个和780个蛋白点，其中622个点位置相匹配。选取有明显差异的5个蛋白点进行质谱分析，鉴定出以下5种蛋白质，其中人晶体结构A链-血清白蛋白复合体(Chain A，Crystal Structure Of The Ga Module Complexed With Human Serum Albumin)、鸟苷酸激酶1(GUK1protein)在成体视网膜组织中高表达；p2-微管蛋白(Tubulin，beta，2)、醛糖移转酶1(Transaldolase 1)、αA-晶体蛋白(alpha A-crystallin)在2个月月龄婴儿的视网膜组织中高表达。 研究结论： 1．Vim为观察Mü0ler细胞在视网膜发育过程中分化和迁移的一个良好标记物。Vim免疫荧光染色结合激光共聚焦显微镜观察，能在任意层面获得三维重构图像，适于研究发育过程中的空间构型变化。 2．人视网膜Müller细胞基本发育成熟的时间为胚胎25～28周。 3．运用二维凝胶电泳较容易从不同年龄视网膜组织获取蛋白质差异点。 4．在正常成体视网膜组织中增加了两种蛋白质：人血清白蛋白(Human Serum Albumin)和鸟苷酸激酶1(GUKl protein)，这些蛋白质随着年龄的增长，可能与视网膜成熟、结构稳定有关。2个月月龄的婴儿视网膜组织中高表达微管蛋白(tubulin)、转醛醇酶(transaldolase)和晶状体蛋白(crystallin)，提示这些蛋白质在发育、抗衰老以及对维持自身内环境的稳定都可能发挥了一定的作用。