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目的：构建pYr-ads-4-PDCD5重组质粒,利用脂质体介导转染于多发性骨髓瘤KM3细胞,并检测PDCD5的表达,为后续进行PDCD5基因促进多发性骨髓瘤细胞凋亡机制的研究提供工具、奠定基础。方法：以pCMV-SPORT6-PDCD5为模板扩增PDCD5基因编码区(CDS区)。琼脂糖凝胶电泳鉴定成功后,将其与pYr-adshuttle-4载体质粒双酶切连接,连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,培养于含卡那霉素(Kan)培养基上,挑取阳性克隆进行双酶切鉴定,并将酶切正确的pYr-ads-4-PDCD5送去测序,把测序结果与欲得到的目的序列比对,从而判断pYr-ads-4-PDCD5重组质粒是否构建成功。pYr-ads-4-PDCD5构建成功后,大量扩增及大量抽提质粒。设转染目的基因组、转染空载体组、未转染组三组,利用LipofectamineTM2000脂质体介导pYr-ads-4-PDCD5转染于多发性骨髓瘤KM3细胞株,48小时后在荧光显微镜下观察转染效率,并予实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR, qPCR)、蛋白免疫印迹术(Western blot)分别检测PDCD5在KM3细胞中的mRNA水平和蛋白水平的表达。结果：PCR扩增PDCD5基因CDS,琼脂糖凝胶电泳获得大约400bp的目的基因,与PDCD5CDS区大小相符,扩增成功。与pYr-adshuttle-4载体质粒酶切、连接,连接产物经转化、培养后,双酶切鉴定切出约400bp的PDCD5目的基因片段带和约7000bp的载体片段带。将酶切正确的pYr-ads-4-PDCD5基因测序结果与欲得到的目的序列比对,显示扩增出的PDCD5基因片段序列完全正确,证明pYr-ads-4-PDCD5重组质粒构建成功。脂质体LipofectamineTM2000介导转染KM3细胞48小时后,目的基因组和空载体组荧光显微镜下观察转染效率约为45%,实时荧光定量PCR及Western blot测定PDCD5mRNA表达水平和PDCD5蛋白表达水平目的基因组均明显高于转染空载体组和未转染组,分别增高约达7倍和2倍,转染空载体组和未转染组间无明显差异。结论：1.pYr-ads-4-PDCD5重组质粒构建成功。2.转染了pYr-ads-4-PDCD5重组质粒的多发性骨髓瘤KM3细胞能够实现PDCD5的成功表达。