【摘 要】
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真菌毒素是一些丝状真菌产生的次级代谢产物,其中玉米赤霉烯酮(ZEN)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和赭曲霉毒素A(OTA)广泛存在于谷物粮油及饲料中,对人和动物都具有较大的毒性作用,并对粮食安全构成重大威胁。本文研制出可同时检测谷物及中药材中ZEN、DON和OTA的两种纳米金免疫层析试纸条,具体研究内容和结果如下:(1)采用Frens法制备球状纳米金,控制还原剂柠檬酸三钠的加入量来考察纳米金大小和
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真菌毒素是一些丝状真菌产生的次级代谢产物,其中玉米赤霉烯酮(ZEN)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和赭曲霉毒素A(OTA)广泛存在于谷物粮油及饲料中,对人和动物都具有较大的毒性作用,并对粮食安全构成重大威胁。本文研制出可同时检测谷物及中药材中ZEN、DON和OTA的两种纳米金免疫层析试纸条,具体研究内容和结果如下:(1)采用Frens法制备球状纳米金,控制还原剂柠檬酸三钠的加入量来考察纳米金大小和形貌情况,并选取了粒径为26 nm(柠檬酸三钠添加量为1.4 m L)左右的球状纳米金为最佳免疫标记材料,通过优化试纸条的工艺参数,研制出可以同时检测ZEN、DON和OTA的球状纳米金免疫层析试纸条,该试纸条检测ZEN的灵敏度为6 ng/m L,检测DON的灵敏度为20 ng/m L,检测OTA的灵敏度为1 ng/m L。(2)采用金种子介导生长法制备花状纳米金,控制氯金酸、金种子和对苯二酚的加入量来考察花状纳米金粒径大小与形貌情况,最终选取了表面分支多、刺突较长的纳米金(0.35 m L氯金酸溶液、0.35 m L金种子液、0.1 m L柠檬酸钠溶液和0.5 m L对苯二酚溶液)为最佳免疫标记材料,通过优化试纸条的工艺参数,研制出可以同时检测ZEN、DON和OTA的花状纳米金免疫层析试纸条,该试纸条检测ZEN的灵敏度为3 ng/m L,检测DON的灵敏度为10 ng/m L,检测OTA的灵敏度为0.5 ng/m L,相对于球状纳米金免疫层析试纸条检测灵敏度提高了两倍。(3)本文所研制的球状和花状免疫层析试纸条经过了特异性和稳定性(环境加速实验)的实验评估,结果表明该试纸条稳定性良好,且不与其他三种常见的真菌毒素(AFB1、FB1、T2)发生交叉反应。(4)将研制好的球状和花状纳米金免疫层析试纸条应用于谷物及中药材中ZEN、DON和OTA的检测,在当地市场及电商平台采购了35个谷物样品(25个小麦,10个玉米)和25个中药样品(11个薏米,14个黄芩),样品经处理后应用于试纸条检测,并用HPLC验证检测,实验表明两者的检测结果具有良好的一致性,故本文所研制的球状和花状纳米金免疫层析试纸条可适用于现场大规模样品的初步筛查。
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