巨桉EgrBZR1在木质部发育中的功能分析

来源 :中国林业科学研究院 | 被引量 : 2次 | 上传用户:wukai110032
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油菜素内酯(Brassinosteroids,BRs)是一种甾醇类的植物内源激素,广泛存在于植物的各种器官,同时参与了植物的细胞分裂与伸长、光形态建成、暗形态建成以及维管系统分化等重要的植物生理过程。本研究通过对巨桉中BZR基因家族进行生物信息学分析,在巨桉中共获得6个BZR家族成员,所有家族成员均含有保守的DUF822功能域,并且均在细胞核中表达,证明EgrBZR家族基因均为转录因子。通过聚类分析EgrBZR家族基因在不同器官中表达丰度,发现该基因家族存在组织差异性表达,此外发现Egr BZR家族基因通过外施处理,能够响应BR、Me JA和SA激素信号,同时还参与到非生物胁迫如盐及冷胁迫的调控机制中,其中EgrBZR1和EgrBES1在不同处理中表达差异最为明显。为了进一步了解EgrBZR1和EgrBES1在巨桉木质部中的功能,本研究克隆EgrBZR1及EgrBES1序列,成功构建亚细胞定位载体、亮氨酸点突变载体以及启动子表达分析载体,并且进行了遗传转化试验。通过亚细胞定位分析发现EgrBZR1和EgrBES1定位于细胞核内,进一步证实其为转录因子。通过烟草遗传转化获得68个超表达EgrBZR1点突变转基因阳性植株,与野生型相比,转基因植株出现茎干明显伸长增粗等现象。不同株系中EgrBZR1表达量的检测结果显示,Line40表达量最高,Line27略高于内参基因。通过进一步的组织切片分析发现,相较于野生型,Line 40木质部分化程度最高,次生木质部在茎中占比增长91%,且细胞壁明显增厚;形成层面积占比增长72%,形成层呈圆环状包围次生木质部,与初生木质部连接,形成小型维管束组织。Line 27维管组织发育与野生型类似,初生木质部数量为野生型的2倍,次生木质部木质化程度加深,形成层细胞占比增长40%。由此可以说明EgrBZR1可以促进木质部的发育,这些研究结果为进一步了解EgrBZR1在维管组织发育过程中起到的重要作用奠定了基础。
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