【摘 要】
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本工作制备了乙烯二氨基三嗪/N-异丙基丙烯酰胺共聚物(PVDT-co-PNIPAAm),并研究了其与DNA形成氢键复合物的性质及该复合物介导的转染。通过无规自由基聚合反应制备PVDT-co-PN
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本工作制备了乙烯二氨基三嗪/N-异丙基丙烯酰胺共聚物(PVDT-co-PNIPAAm),并研究了其与DNA形成氢键复合物的性质及该复合物介导的转染。通过无规自由基聚合反应制备PVDT-co-PNIPAAm共聚物,并精制出水溶性部分,傅立叶变换红外光谱证实了共聚物的生成。GPC显示所合成的PVDT-co-PNIPAAm共聚物的分子量比较小。由260纳米紫外吸光度的测定确定了共聚物的摩尔共聚比,并定量了任意未知浓度聚合物水溶液的浓度。制备了不同比例的PVDT-co-PNIPAAm载体/pDNA复合物,琼脂糖凝胶电泳证实该共聚物能有效缩合DNA,且电泳条带呈现典型氢键特征。透射电镜(TEM)下发现,复合物形态依赖于载体/DNA的复合比,呈现球状或大尺寸聚集物,类似于阳离子载体缩合DNA的形态。体外细胞转染实验揭示,基于氢键结合DNA的PVDT-co-PNIPAAm共聚物载体可成功地将pGL3质粒转入COS-1细胞中,总体上转染效率比裸DNA高30～66倍,与商业化非病毒载体Exgen 500的转染效率仅相差一个数量级。通过改变培养温度,VDT-NI-6-1载体转染效率较37℃恒温转染有一定的提高,是37℃恒温转染的1.7～4.5倍。同时MTT法显示PVDT-co-PNIPAAm共聚物载体细胞毒性很低。
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