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目的: 细胞因子是体内细胞之间相互作用的主要介质,细胞因子的产生和相互作用、细胞因子或其受体数量的增减或分布异常以及细胞因子的网络调节失衡常常与疾病的发生相关。嗜铬细胞瘤的发病机制较为复杂,目前尚未研究清楚,尤其对细胞因子与嗜铬细胞瘤发病的关系及其作用机制的研究罕见报道。本课题旨在细胞和分子水平上研究几种与肿瘤生长相关的细胞因子,即转化生长因子α(TGFα)、肿瘤坏死因子α(TNFα)和血管内皮生长因子(VEGF)对嗜铬细胞瘤细胞生长和凋亡的作用,以及在嗜铬细胞瘤和正常肾上腺髓质组织中上述细胞因子mRNA和蛋白表达的差异,以探讨它们在嗜铬细胞瘤发病机制中的作用。 方法: 1.采用连续分次胶原酶消化法分离培养人原代嗜铬细胞瘤细胞,经检测细胞培养液中儿茶酚胺水平、多聚甲醛诱发荧光,及采用细胞嗜铬粒蛋白A(CgA)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的免疫组化染色等方法进行细胞性质和功能鉴定,并用噻唑兰(MTT)法观察原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞的生长状况。 2.从1998年6月至2002年3月间手术切除的22例嗜铬细胞瘤组织及18例意外死亡者的正常肾上腺组织中,提取RNA和经RT-PCR半定量方法,比较TGFα、TNFα和VEGF在嗜铬细胞瘤和正常肾上腺髓质组织中mRNA表达的差异。 3.取北京协和医院病理科于1997年—2002年3月保存的石蜡包埋的27例嗜铬细胞瘤组织和14例正常。肾上腺组织,用免疫组化方法比较TGFα、TNFα和