节段型神经纤维瘤病的临床及NF1基因突变研究

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背景 I型神经纤维瘤病(neurofibromatosis type 1,NF1)是一种常染色体显性遗传性疾病,临床表现为皮肤牛奶咖啡斑、腋窝和腹股沟雀斑、神经纤维瘤、虹膜错构瘤(Lisch结节)、神经胶质瘤、学习障碍、癫痫和骨骼发育不良等。节段型神经纤维瘤病(segmental neurofibromatosis,SNF)是NF1的罕见类型,其临床特征表现为皮肤牛奶咖啡斑和神经纤维瘤同时或分别分布在一个或多个皮区内。NFI基因定位于人类染色体17q11.2中央区,负责编码神经纤维瘤蛋白。NF1基因是一种抑癌基因,通过神经纤维瘤蛋白对Ras进行负向调控,参与细胞生长、分化和肿瘤的发生。迄今为止,在人类基因突变数据库中查询到NFI基因突变点有2600多个,突变类型包括错义突变和无义突变、剪切突变、插入、缺失和重复,大多数突变导致了截短蛋白的表达。国内外对NF1基因进行了大量研究,不过关于NF1基因型和表型的关系尚不明确。目的分析一例以严重凸眼、半脸牛奶咖啡斑为特征的SNF患者的临床表现,并检测NF1基因,丰富NF1基因突变数据库,为NF1的遗传咨询、产前诊断、基因诊断奠定基础。再利用本研究检测结果,结合既往文献报道,探讨NF1突变及其基因型和临床表型的关系。方法对该SNF患者进行颅脑核磁共振检查(MRI)及眼科检查,获得相关影像及数据。抽取该患者及其父母的外周血,提取DNA,设计NF1所有外显子引物,通过PCR反应进行基因扩增,并进行基因测序。结果(1)临床发现:患者右侧头面部、躯干、四肢散在数个分界良好、表面光滑的牛奶咖啡斑,右眼眼球明显突出,右眼视力降低,左侧肢体伴有阵发性抽搐,出现一次癫痫持续状态。颅脑MRI示右侧颅内海绵状血管畸形伴陈旧性出血和右侧大脑半球及间脑萎缩,右眼球突出,右侧玻璃体增大变形,右侧视神经增粗。眼科检查示右眼眼压升高,诊断继发性青光眼。(2)NF1基因突变分析:直接DNA测序显示外显子13的6个点突变、外显子18的1个点突变、外显子30的1个杂合缺失突变和3’非翻译区(UTR)的2个点突变。它们分别是c.1400C>T、c.1448A>G、c.1458A>G、c.1461A>G、c.1466A>G、c.1513A>G、c.2034G>A、chr17:31248997-/G、chr17:31376357 G>A、chr17:31376421 C>G。除外c.1466A>G之前已经报道,其余9个均为首次报道。4个错义突变包括p.Thr4671Ile、p.Asp483Gly、p.Tyr489Cys 和 p.Lys505Glu,分别由 NF1 的 mRNA中的 c.1400C>T、c.1448A>G、c.1466A>G 和 c.1513A>G 编码,经 PolyPhen 预测,这4个突变为有害突变。结论 NF1 基因的突变 c.1400C>T、c.1448A>G、c.1458A>G、c.1461A>G、c.1466A>G、c.1513A>G、c.2034G>A、chr17:31248997-/G、chr17:31376357 G>A、chr17:31376421 C>G扩展了 NF1基因突变数据库,可能为该SNF患者发病的原因,并且可能与单侧头面部咖啡斑、单侧眼球突出、颅内海绵状血管畸形和单侧脑萎缩相关。
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