目的:本实验旨在研究DCLK1对TGF-β1诱导的人肺成纤维细胞表型转化的影响,初步探讨DCLK1对此过程中的自噬和凋亡的影响,为肺纤维化发生机制的探究提供新思路。方法:(1)利用TGF-β1诱导人肺成纤维细胞(HLFs)表型转化,再通过q RT-PCR检测细胞DCLK1 m RNA表达,Western Blot检测DCLK1、Fibronectin、α-SMA蛋白表达水平。(2)利用si-RNA敲低人肺成纤维细胞DCLK1基因(si-DCLK1)后,再予TGF-β1处理,通过Western Blot检测细胞DCLK1、Fibronectin、α-SMA及自噬相关蛋白LC3-I、LC3-II、p62的表达水平,同时流式细胞学检测细胞凋亡情况;(3)通过DCLK1抑制剂(LRRK2-IN-1)作用于人肺成纤维细胞后,再予TGF-β1处理,通过Western Blot检测细胞DCLK1、Fibronectin、α-SMA及自噬相关蛋白LC3-I、LC3-II、p62表达水平,同时流式细胞学检测细胞凋亡情况。结果:(1)通过TGF-β1诱导人肺成纤维细胞(HLFs)表型转化后,q RT-PCR检测提示实验组中DCLK1 m RNA相对表达量较对照组高,WB检测提示DCLK1、Fibronectin、α-SMA的蛋白表达水平较对照组明显增高。(2)利用si-RNA敲低人肺成纤维细胞DCLK1基因(si-DCLK1)或DCLK1抑制剂(LRRK2-IN-1)作用后,Western Blot检测结果提示DCLK1、Fibronectin、α-SMA、p62表达较对照组减弱,而自噬相关蛋白LC3-I、LC3-II表达较对照组增强,流式细胞学检测提示实验组较对照组细胞凋亡增强。结论:(1)DCLK1在人肺成纤维细胞表型转化中过表达;(2)在人肺成纤维细胞表型转化中,抑制或敲低DCLK1后,成纤维细胞表型转化过程将减弱,细胞外基质减少;(3)在人肺成纤维细胞表型转化中,抑制或敲低DCLK1后,自噬和凋亡增强。