【摘 要】
:
在真核细胞中,DNA 的复制被严格的调控,以确保遗传物质传递的保真性。DNA 复制起始的控制机制确保了 DNA 在一个细胞周期中只能被复制一次,使 DNA 的合成被严格地控制在 S 期。
论文部分内容阅读
在真核细胞中,DNA 的复制被严格的调控,以确保遗传物质传递的保真性。DNA 复制起始的控制机制确保了 DNA 在一个细胞周期中只能被复制一次,使 DNA 的合成被严格地控制在 S 期。目前已被发现的人类 DNA 复制起始蛋白大约有20个。AD24蛋白是酿酒酵母Noc3在人类的同源蛋白,参与了人类细胞的DNA复制的起始。通过酵母双杂交等方法,可以筛选到更多与复制起始相关的蛋白。BRD7 便是通过这一方法,从人类卵巢上皮细胞cDNA文库中筛选到的与AD24相互作用的蛋白。本文通过酵母双杂交系统,观察BRD7与其他人类复制起始蛋白的相互作用,进一步验证BRD7确实与DNA复制起始相关。
在本文的酵母双杂交系统中,BRD7基因首先与带有GAL4转录激活域(AD)的pACT2质粒融合,构建成“猎物”(prey),AD24等14种人类复制起始蛋白则与带有GAL4 DNA结合域 (BD) 的pGBKT7质粒融合而成为“诱饵”(bait)。结果发现除了 AD24 外,还有 ORC1,ORC4,ORC5和MCM2这四个蛋白与BRD7有相互作用。随后,本文还将BRD7基因构建到pGBKT7质粒上成为“诱饵”(bait),观察其与作为“猎物”(prey)的上述5个蛋白的相互作用。
为了进一步了解 BRD7 与这些蛋白相互作用的细节,本文还构建了含有 BRD7分段片断的 pGADT7 融合质粒作为“猎物”(prey),与这5个蛋白进行酵母双杂交实验,从而确定究竟是BRD7的哪一部分参与到了与这些蛋白的相互作用中。经过分析,无论是作为“猎物”(prey)还是“诱饵”(bait),BRD7与人类蛋白的5个蛋白都存在较强的相互作用。而分段研究的结果则揭示了BRD7与这些蛋白相互作用的区域,其中与C-端相互作用的只有ORC4,MCM2与ORC5这三个蛋白。以上结果提示BRD7可能通过各个不同区域与不同DNA复制起始蛋白的结合,而在人类DNA复制起始前复合物中扮演“组织者”或“协调者”的角色。
其他文献
奶牛乳房炎是奶牛的一种多发病、常见病,导致了奶牛场的巨大经济损失。链球菌(停乳链球菌,乳房链球菌和无乳链球菌)是奶牛乳房炎主要致病菌种之一。用疫苗来防治奶牛乳房炎具有
干旱是玉米生产的主要限制因素。通过品种改良提高玉米品种耐旱能力,是克服干旱危害最为经济有效的方法。然而,玉米的耐旱性为微效多基因控制的数量性状,遗传改良比较困难,多年来进展不大。转基因技术可以打破物种间生殖隔离,转化利用其他物种有益基因。国内外曾用SOD、DREB等多种抗逆耐旱基因转化玉米,试图提高其耐旱性,但因这些基因耐旱能力不够强,耐旱机制与玉米生理代谢不协调等原因,转基因后代的耐旱性不能达到
本研究通过“T”型容器法来研究高加索三叶草的根系生长状况,同时用不同留茬高度的刈割来模拟家畜利用,以研究对高加索三叶草的再生性能和产草量以及对地下器官生长和贮藏性营养物质的影响。同时也研究了高加索三叶草贮藏营养物质的季节动态。研究结果如下:1高加索三叶草根系在0~70cm的生长速度呈现慢-快-慢的变化趋势,平均生长速度为1.59cm/d,在移栽后34d,日生长量达最大值,为3.29cm。2高加索三
本研究采用PCR-SSCP和PCR-RFLP方法研究了131头南阳牛群体DGAT1、DGAT2、IGF2、IGFBP-3和MEF2基因共6个位点的多态性,并分析了它们与南阳牛生长发育性状的的相关性,得到如下
箭叶橐吾(ligularia sagitta mattf)是一种广布于青藏高原东部退化草场的菊科杂草,含有毒乳汁,在草场常形成斑块状分布,严重危害草场安全。本实验研究了箭叶橐吾对九种牧草的化
本研究从吉林化工厂污水排污口於泥、四平金士百啤酒厂污水排污口於泥、四平联合化工有限公司污水排污口於泥和江苏常州咔唑生产厂地表污染土四个样品中分离到12株可以在咔唑为唯一碳源和氮源的CNFMM选择固体平板上良好生长的革兰氏阴性细菌株。通过16S rDNA基因序列比对分析,12个菌株分别属于6个菌属。JH061、PJ062、JS061和JS062四个菌株属于鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas s
本文对天童常绿阔叶林萌枝更新的生态学进行了研究。结果如下: (1)应用树干解析法对本地区4个常见优势种萌生个体和实生个体树高和地径两方面的生长特点进行分析,发现在生长
研究背景与目的:铀是一种严重的环境风险因子,具有化学及放射性毒性。肝脏和肾脏是铀的主要靶器官。目前发现,氧化应激是铀毒性的重要机制之一,使用抗氧化剂或许能清除铀在体内诱导产生的自由基,具有一定的保护肝肾功能的作用。硫化氢(H2S)被认为是继NO和CO之后的第三类气体信号分子,研究证实H2S具有抗氧化应激、抗炎症反应,细胞及器官保护作用等多种生物学效应。在许多肝肾疾病的病理生理过程中,H2S也起着关
由于特殊的地理、气候和水热条件,使得重庆境内植被类型丰富,植物资源种类繁多,该区也成为我国特有、孑遗、珍稀濒危及保护植物,单种科、属植物集中分布区之一。金毛狗(Cibotium