葡萄糖对腹膜间皮细胞的损害及其中活性氧所起作用的实验研究

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目的:1.研究葡萄糖、过氧化氢、抗氧化剂对于人腹膜间皮细胞(humanperitoneal mesothelial cell,HPMC)细胞周期的影响及其机制.2.研究葡萄糖、过氧化氢、抗氧化剂对于HPCM增殖的影响.3.研究葡萄糖、过氧化氢、抗氧化剂对于HPMC表达趋化蛋白的影响.方法:1.流式细胞仪测定细胞周期中G1期细胞的比例,RT-PCR法测定细胞周期素依赖的激酶抑制剂(cyclin-dependent kinase lnhibitor,CKI)p21、p27的基因表达;细胞免疫组化法及Western Blotting法测定p21、p27的蛋白水平.2.<3>H-TdR掺入法测定细胞增殖率.3.TR-PCR法测定趋化因子IL-8、MCP-1基因水平,ELISA法测定IL-8的蛋白水平.结论:1.高糖、外源性过氧化氢可使HPMC呈现肥大,细胞周期停滞,且高糖增加了过氧化氢的毒性,高糖的这种作用与内源性的活性氧(过氧化氢)有关,阻断之可使细胞周期停滞改善.高糖、过氧化氢的细胞周期停滞作用还与p21、p27表达增加有关,且内源性过氧化氢参与了高糖对p21表达的调节,而在高糖对p27的调节中则可能关系不大.2.高糖、过氧化氢可使HPMC的增殖受到抑制,加入抗氧化剂可改善,提示临床上抗氧化治疗可能有益.3.高糖、过氧化氢可使HPMC表达IL-8上升,高糖的作用与内源性的过氧化氢有关,提示临床上抗氧化治疗对改善腹膜透析液的生物相容性有益;高糖可使HPMC表达MCP-1上升,这与腹膜纤维化有关,内源性过氧化氢与作用可能关系不大.
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