【摘 要】
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目的:探讨斑点胶体金免疫法检测患者不同体液中幽门螺杆菌(HP)抗原的可行性,为临床研发简单易用的“HP抗原金免疫色谱检测试剂盒”提供实验依据。方法:(1)收集筛选高效价兔和
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目的:探讨斑点胶体金免疫法检测患者不同体液中幽门螺杆菌(HP)抗原的可行性,为临床研发简单易用的“HP抗原金免疫色谱检测试剂盒”提供实验依据。方法:(1)收集筛选高效价兔和人HP免疫血清,盐析法和层析法分离纯化得到HP多克隆抗体。(2)采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的特异性人抗Hp抗体,制成金标抗体。(3)将纯化的特异性兔抗HP抗体固定于硝酸纤维素膜上,制成斑点金标免疫反应模板。分别取粪便、胃液、血清与反应模板结合,然后与金标记的人抗HP抗体于37℃进行反应,阳性结果呈现肉眼可见的红斑。结果: (1)斑点金免疫法对比测定42例患者的胃液、粪便及血清,其中胃液斑点金法测定阳性26例,阴性16例,阳性率61.9%,准确性69.04%;粪便斑点金法测定阳性27例,阴性15例,阳性率64.29%,准确性57.14%;血清斑点金法测定阳性10例,阴性32例,阳性率23.81%,准确性40.48%。(2)胃液斑点金法与尿素酶试验对比检测60例患者,其诊断符合率61.67%。(3)胃液斑点金法与血清学HP抗体检测对比测定60例患者,其诊断符合率65%。结论:(1)斑点金法检测胃液HP抗原诊断HP感染是可行的。(2)斑点金法检测胃液HP抗原的准确性高于粪便和血清HP抗原的检测。(3)斑点金法检测粪便HP抗原的阳性率虽然高于胃液和血清HP抗原的检测,但是粪便HP抗原检测的假阳性率也高。(4)斑点金法检测HP抗原具有操作简便、快速,无创伤,结果判断无须依靠任何仪器,还可以避免抗体检测“实时性差”的缺陷等优点,发展前景广阔。
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