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促进创面愈合是中医外科临床的主要目标之一,鼓舞气血以生肌敛疮是其指导思想。当归补血汤又名黄芪当归汤、补血汤、芪归汤等,是金元时代李东垣所创造的益气补血方剂,由黄芪、当归组成,具有补气生血的功能。充满生机活力的血管网是气血充盈的物质基础之一,肉芽鲜活红润、敛疮收口的局部辩证之所见,正是气血旺盛病机的内涵,也是血管新生等生物学过程系统效应的体现。现有研究表明,中药制剂修复创面的生物学过程与现代创伤修复理论一致,创面组织的生长与存活离不开血液供应,因此,血管新生是创伤修复过程中修复细胞及组织细胞赖以生存生长的重要基础之一。在促血管新生的研究中,要求药物作用时间能够顺应创伤修复的规律,达到良性干预的目的。课题组通过制剂学的方法,将中药复方当归补血汤提取物,配合缓控释高分子材料,优化其配比及成囊工艺,控制其药物释放,达到零级动力学要求,制成控释微囊,再载入修饰后可降解胶原原位诱导、促进血管新生。本研究分别以细胞模型和整体动物模型为研究对象,以本实验平台为技术支撑,从组织、细胞、调控蛋白再到关键基因,层层递进深入,揭示当归补血复合微囊促进创面愈合的JAK2/STAT3信号传导通路及其相关关键蛋白和基因靶点,从一个侧面阐述当归补血复合微囊促愈的现代生物学物质基础及其机制。首先,本研究以人脐静脉血管内皮细胞HUVEC为模型,分别采用CCK-8和流式细胞术检测HUVEC细胞活力和细胞凋亡情况；采用Western blot检测各组中STAT3、VEGF的表达情况;采用荧光定量PCR,检测各组中VEGF基因和miRNA-21的表达情况。探讨JAK2/STAT3信号传导通路在当归补血复合微囊促血管新生中的作用。结果显示20μg/1 nL当归补血复合微囊作用于HUVEC 24h,可有效促进HUVEC的增殖。当归补血复合微囊能促进HUVEC的增殖,并上调STAT3、VEGF及VEGFmRNA, miRNA-21的表达,其促进血管生成的作用与JAK2/STAT3信号途径有关。AG490能有效抑制当归补血复合微囊对HUVEC的促增殖作用,并减少STAT3、VEGF及VEGFmRNA, miRNA-21的表达,进一步验证说明当归补血复合微囊促进血管生成的作用确实与JAK2/STAT3信号途径有关。其次,本研究采用鸡胚绒毛尿囊膜CAM实验,结果显示,当归补血复合微囊可有效促进鸡胚绒毛尿囊膜血管新生,其中20-60μg/ml各剂量组的促血管新生作用显著。最后,本研究采用外科方法纵行切开背部皮肤建立了大鼠创伤模型,从整体动物层面中羟脯氨酸含量、HE染色肉芽组织增生情况、CD34标记的微血管数量、massol染色胶原纤维生成情况,蛋白层面中STAT3蛋白磷酸化水平和VEGF水平,以及基因层面中VEGF mRNA和miRNA-21的表达等不同层次阐述了当归补血复合微囊胶原在大鼠损伤模型中的修复作用。结果显示,当归补血复合微囊给药后肉芽组织中羟脯氨酸含量增加,肉芽组织毛细血管及成纤维细胞增生活跃,创面微血管数量增加,胶原纤维生成密度均匀、排列有序。当归补血复合微囊可激活p-STAT3和VEGF蛋白表达,上调VEGF mRNA和miRNA-21基因转录水平。当归补血复合微囊可加快创面愈合,具有促进血管新生的作用。综上所述,当归补血复合微囊促进创伤愈合的作用途径之一可能是通过JAK2*STAT3信号通路完成,促进HUVEC的增殖,并上调STAT3.VEGF及VEGFmRNA,miRNA-21的表达,增加肉芽组织中羟脯氨酸含量,促进肉芽组织毛细血管和成纤维细胞增生,增加创面微血管数量和胶原纤维,最终实现创面的愈合。