山茱萸籽鞣质的提取工艺及降血糖作用的初步研究

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山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc.)是山茱萸科(Cornaceae)山茱萸属(Cornus)植物,主要分布在浙江、河南、陕西和安徽等省,具有补益肝肾,收敛固涩的功效,是我国传统的大宗药材之一。山茱萸果肉中含有环烯醚萜苷、皂苷、多糖、鞣质、有机酸等多种有效成分。药理研究表明,山茱萸果肉具有抗氧化、抗炎、降血糖、抗菌和抗肿瘤等作用,是临床广泛应用的中药材,在传统的古方中山茱萸亦作为治疗消渴症的要药。山茱萸籽中富含鞣质成分,在传统的山茱萸炮制工艺中,山茱萸籽一般被当做杂质去除。近年的研究表明鞣质具有抗脂质过氧化、抗病毒、抗菌、抗炎、抗过敏和降血糖等功效。因此,本研究通过响应面法优化山茱萸籽鞣质的提取工艺,比较不同产区山茱萸籽鞣质的含量差异,在体外研究山茱萸籽鞣质对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并进行了酶抑制动力学研究,运用高脂高糖喂养联合低剂量链脲佐菌素诱导的糖尿病模型,检测山茱萸籽鞣质对糖尿病小鼠空腹血糖(GLU)、糖耐量(OGTT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)及丙二醛(MDA)等方面的影响,为山茱萸在糖尿病的预防和治疗方面提供理论依据。同时也为山茱萸的标准化炮制和产品的高值化提供技术支持。主要的研究结果如下:1.运用响应曲面法优化山茱萸籽中鞣质类化合物的提取工艺,最佳的优化条件为:乙醇浓度42%,料液比1:22,超声时间71 min,超声温度51℃,模拟预测结果和实验检测结果基本吻合。2.不同产区山茱萸籽鞣质的含量比较:不同省份山茱萸籽鞣质含量从高到低依次为河南省、浙江省、陕西省,河南省山茱萸籽鞣质变异系数较小,稳定性好。3.山茱萸籽鞣质体外酶抑制动力学研究:山茱萸籽中鞣质类化合物和阳性药阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50值为1076 mg/L和1081.78 mg/L,表明山茱萸籽对α-葡萄糖苷酶有较好的抑制作用;α-葡萄糖苷酶的抑制动力学研究表明,山茱萸籽中鞣质类化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制类型为非竞争性抑制。4.山茱萸籽鞣质降血糖作用的初步研究:山茱萸籽鞣质对高脂高糖小鼠的体重无显著影响,能延缓小鼠空腹血糖的升高,并且高剂量山茱萸籽鞣质对小鼠的糖耐量有一定的改善作用,能预防糖尿病的发生;给药20 d后,高、中剂量山茱萸籽鞣质显著降低糖尿病小鼠的空腹血糖,提高了小鼠的糖耐量,同时高剂量山茱萸籽鞣质显著降低糖尿病小鼠TC、TG、LDL、MDA的含量,提高HDL的含量,且呈剂量依赖性,说明山茱萸籽鞣质对糖尿病小鼠有较好的降糖作用。
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