论文部分内容阅读
目的：比较依达拉奉（EDA）和神经节苷脂（GM1）预处理对谷氨酸及过氧化氢不同性质损伤后大鼠皮层脑片的神经保护作用。 方法：采用新生7日龄SD大鼠，取出大脑后采用切片机将皮层部分切为脑片进行离体脑片培养，因不同性质损伤采用谷氨酸损伤模型和过氧化氢损伤模型两种模型，两种损伤模型又分别分为对照组、损伤组、100μmol/L EDA预处理组及1μmol/L GM1预处理组，由于对照组相同，所以共分7组，每组12例。对照组脑片培养第四天用正常培养基替代损伤培养基孵育30min；损伤组（分2组）脑片于培养第四天给予含1mmol/L谷氨酸或0.1mmol/L过氧化氢的培养基孵育30min；药物保护预处理组（分4组）脑片于培养第三天转至含有100μmol/L EDA或1μmol/L GM1的培养基中孵育24h，第四天同损伤组。谷氨酸或过氧化氢损伤后24h测定脑片2,3,5－三苯基四氮唑(TTC)染色的A490值并计算组织损伤率，用乳酸脱氢酶（LDH）释放率分析脑片活性，用荧光染料Propidium Iodide(PI)观察细胞损伤程度；损伤后72h脑片用尼氏体染色检测神经元数量，用苏木素-伊红(HE)染色后在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化，用透射电镜观察细胞超微结构改变，用免疫组织化学方法检测Caspase-9阳性表达细胞的数量。 结果：1.谷氨酸损伤模型两种药物预处理保护组与损伤组相比：药物预处理组皮层脑片TTC染色A490值均升高，组织损伤率均减小，LDH释放率均减小，PI荧光显示红色损伤细胞数均减少，神经元密度均增高，细胞形态受损程度和神经元超微结构病变均减轻，caspase-9表达阳性细胞均减少；2.谷氨酸损伤模型两种药物预处理保护组之间比较：均无发现明显差异；3.过氧化氢损伤模型两种药物预处理保护组与损伤组相比：药物预处理组皮层脑片TTC染色A490值均升高，组织损伤率均减小，LDH释放率均减小，PI荧光显示红色损伤细胞数均减少，神经元密度均增高，细胞形态受损程度和神经元超微结构病变均减轻，caspase-9表达阳性细胞均减少；4.过氧化氢损伤模型两种药物预处理保护组之间比较：均无发现明显差异。 结论：两种药物EDA或GM1预处理可使谷氨酸或过氧化氢损伤后的新生大鼠皮层脑片的神经元细胞损伤程度减轻，凋亡细胞的数量减少。但两种药物在该实验采用的剂量下，其预处理效应无统计学差异。