【摘 要】
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目的1、初步探讨可注射聚谷氨酸苄酯微球（PBLG）体外生物学特性及体内组织相容性;2、利用可注射PBLG多孔微球,构建皮下组织工程化脂肪组织;3、利用聚谷氨酸（PLGA）/壳聚糖（CS）支架构建硬膜外脂肪组织,预防椎板切除术后硬膜外瘢痕的增生。方法1、将分离的人成纤维细胞（h FBs）其接种在PBLG微球上,于体外观察PBLG对接种于的h FBs的细胞增殖及胶原合成相关基因的影响;通过组织学染色,
【基金项目】
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国家自然科学基金（编号:81271724）；
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目的1、初步探讨可注射聚谷氨酸苄酯微球（PBLG）体外生物学特性及体内组织相容性;2、利用可注射PBLG多孔微球,构建皮下组织工程化脂肪组织;3、利用聚谷氨酸（PLGA）/壳聚糖（CS）支架构建硬膜外脂肪组织,预防椎板切除术后硬膜外瘢痕的增生。方法1、将分离的人成纤维细胞（h FBs）其接种在PBLG微球上,于体外观察PBLG对接种于的h FBs的细胞增殖及胶原合成相关基因的影响;通过组织学染色,观察体内微球注射后的组织相容性;2、将分离的人脂肪干细胞（h ASCs）接种在PBLG微球上构建细胞/材料复合物,体外观察h ASCs在PBLG微球上的成脂情况,然后将构建好的成脂诱导的细胞/材料复合物注射到裸鼠体内,于第4周和第8周分别取材,通过组织形态学观察（H&E,Masson,油红O染色及SEM检查）及生物化学分析（Real-time PCR,GPDH活性及羟脯氨酸定量）,来检测新生物是否具有正常脂肪组织的形态及功能特点;3、将分离的新西兰大白兔脂肪干细胞（r ASCs）接种在PLGA/CS支架上构建细胞/支架复合物,回植到新西兰大白兔硬膜外脂肪缺损区,于术后第1、12、24周MRI检查动态观察组织的修复情况,并于第24周取材,行组织学染色,评估组织的修复情况。结果1、PBLG微球的生物相容性好,能抑制h FBs的I和III型前胶原基因的表达,同时能促进IL-8基因的表达,但对TGFβ1基因的调控作用不明显;2、利用可注射PBLG微球构建的新生组织,在形态学上,与正常脂肪组织类似,都是由带有血液供应的小叶样微组织构成;在生物化学上,成脂分化的相关指标的表达都明显增强;3、利用PLGA/CS支架构建的硬膜外新生组织,具有脂肪组织特性,其所在组的硬膜外瘢痕的增生程度较对照组明显减轻。结论1、PBLG多孔微球具有良好的生物学特性,能调控h FBs中的COL1、COL3以及IL-8基因的表达;2、PBLG多孔微球可作为构建皮下组织工程化脂肪组织的支架材料,适合于软组织缺损的充填;3、利用r ASCs与PLGA/CS支架构建的脂肪组织,可预防硬膜外瘢痕粘连的增生。
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