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油菜是世界范围内重要的油料作物之一,菜籽油是我国自产食用植物油的第一大来源。利用杂种优势可以有效地提高油菜的产量,而雄性不育是油菜杂交种生产的最主要途径。细胞核雄性不育由于其不育性稳定、彻底,不受胞质负效应影响等特点,在油菜杂种优势利用中占有越来越大的比例。目前,针对油菜细胞核雄性不育基因开发的标记,大多是与目标基因紧密连锁的标记,而基于目标基因自身DNA序列多态性开发的功能标记很少。本研究旨在前人研究的基础上,开发甘蓝型油菜隐性核不育基因BnMsl和BnMs2的特异分子标记,并将它们与高油酸、低亚麻酸分子标记结合使用,开展高油酸、低亚麻酸性状转育隐性核不育系的分子标记辅助选择研究,以实现杂种优势利用与品质育种相结合,为高油酸、低亚麻酸杂交新品种选育创造优良材料。主要研究结果如下:1、基于BnMsl的SNP位点和BnMs2序列长度差异,分别设计了2位点特异引物和4条等位基因特异引物,结合PCR扩增效果的优化,获得了在不育和可育材料中有多态性的基因特异标记ZLMS1和ZLMS2。2、根据SNP位点等位基因特异引物PCR效果,发现仅包含一个单碱基差异的引物无法显示SNP差异,而通过在引物3’-端第3位引入A/T错配可得到理想的多态性扩增,但同一位置的C/T错配扩增效果没有A/T错配的特异性强。这些结果对利用错配技术提高SNP标记应用范围具有参考意义。3、利用上述不育基因特异分子标记,对高油酸低亚麻酸转育核不育系的各世代单株进行基因分型。在供检测的每个世代群体中,育性基因型的分离结果均与理论一致。同时,从3078个单株的BC2F1群体筛选出的10株(χ2=0.089)携带有高油酸低亚麻酸位点的不育株,在花期进行育性调查,发现基因型和表现型均一致。4、利用油酸和亚麻酸等位基因特异分子标记,对F2代自交种子进行油酸和亚麻酸含量的分析,结果表明:在含有高油酸和低亚麻酸位点的单株中,种子油酸含量达到73%以上,亚麻酸含量低于5%,表明标记辅助选择能在早期有效鉴定出所需基因型。5、通过分子标记辅助选择,在BC1F2代已得到携带有高油酸、低亚麻酸位点的不育株和相应的保持株,其遗传背景最高已回复到轮回亲本的88.67%和91.67%。获得了可用于选育高油酸、低亚麻酸油菜杂交种的新材料。