【摘 要】
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目的:近年来,过敏性疾病发病率逐年上升。血清过敏原特异性IgE(specific IgE,sIgE)检测,目前广泛用于过敏性疾病的诊断中。但常出现假阴性及假阳性结果。本研究旨在分析引起过敏的屋尘螨蛋白组分,并通过分离纯化提高屋尘螨sIgE检测的准确性。方法:1.对2021.01~2022.01就诊于河北医科大学第四医院皮肤科门诊的石家庄市及其周边患有过敏性皮肤疾病且行sIgE检测的患者,进行流行病
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目的:近年来,过敏性疾病发病率逐年上升。血清过敏原特异性IgE(specific IgE,sIgE)检测,目前广泛用于过敏性疾病的诊断中。但常出现假阴性及假阳性结果。本研究旨在分析引起过敏的屋尘螨蛋白组分,并通过分离纯化提高屋尘螨sIgE检测的准确性。方法:1.对2021.01~2022.01就诊于河北医科大学第四医院皮肤科门诊的石家庄市及其周边患有过敏性皮肤疾病且行sIgE检测的患者,进行流行病学调查及对检测结果的初步分析;2.采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)初步分离纯化;3.采用免疫印迹实验(western-blot,WB)对屋尘螨粗提取物致敏蛋白组分进行分析;4.采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)-质谱(mass spectrometry,MS)联用(LC-MS)技术分析阳性反应条带中蛋白组分。结果:1.就诊于河北医科大学第四医院皮肤科门诊的石家庄市及其周边患有过敏性皮肤疾病的患者,其过敏原主要是鸡蛋白(31.09%)、牛奶(22.71%)、猫/狗毛组合(17.81%)、牛/羊肉组合(15.47%)以及尘螨组合(11.14%)。2.流行病学调查(1)2021.01~2022.01就诊于河北医科大学第四医院皮肤科门诊的患有过敏性皮肤疾病且血清过敏原检测阳性患者共计1409例,其中女性患者872例,男性患者537例,平均年龄33.97岁;(2)过敏性皮肤疾病主要以慢性荨麻疹、皮炎和湿疹为主,慢性荨麻疹患者474例,居所有病种首位;(3)尘螨组合sIgE阳性患者共计157例。将患者流行病学调查结果和临床表现对比后发现:61例患者临床调查结果与血清尘螨组合sIgE检测结果不相符。3.屋尘螨粗提取物SDS-PAGE结果可见14条深浅不一的蛋白条带,相对分子量分别为:129 kDa、111.7 kDa、108 kDa、78.2 kDa、63.4 kDa、60 kDa、48.3 kDa、38.3 kDa、35.8 kDa、31.7 kDa、28.3 kDa、20 kDa、16.7 kDa和11.7 kDa;4.WB检测结果示:61.7 kDa~66.4 kDa、41.4 kDa~43.7 kDa、33 kDa、26.2 kDa~28.9 kDa和15 kDa~18.1 kDa处可见阳性反应条带,根据相对分子量推测为Der p4、Der p9、Der p10、Der p8、Der p3、Der p1和Der p2;5.WB中最高荧光反应条带质谱分析结果示:Der p2、Der p8、Der p10、Der p13、Der p14和Der p21。结论:1.引起石家庄市及周边地区过敏性皮肤疾病的过敏原主要是鸡蛋白、牛奶、猫/狗毛组合、牛/羊肉组合以及尘螨组合。2.石家庄及周边地区尘螨过敏患者的主要致敏蛋白组分除了Der p2和Der p10外Der p8、Der p13、Der p14和Der p21同样重要。
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