华南部分地区PRRSV的分离、遗传进化分析及综合防控措施研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:aa121222
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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染引起,以各阶段猪群的呼吸道疾病和种猪群繁殖障碍为主要表现症状。PRRS在上世纪八十年代首次报道于美国北卡罗纳州,随后很快传入欧洲和亚洲,成为困扰全球养猪业的主要疾病之一。自1995年传入我国以来,PRRSV持续广泛传播并快速变异。2006年,我国江西省首次发生了高致病性PRRSV的流行,引起以高热、高发病率和高死亡率为特征的“高热病”,对养猪业造成了惨重的打击。我国在2008年将高致病性PRRS列入一类动物传染病。2013年,NADC30-like毒株传入我国,该类毒株具有极高的重组倾向,在田间产生大量的新毒株,加大了PRRS防控的难度。PRRSV是进化速度最快的病毒之一,持续不断的突变和重组是其进化的主要方式,导致田间流行毒株的多样性和复杂性,为疾病防控带来了难度和挑战。PRRS至今已广泛流行30多年,仍没有诞生理想的疫苗。尽管弱毒苗能诱导一定的同源保护力,但对异源毒株不能产生有效保护,且存在毒力返强等诸多安全性问题。而灭活苗被证实对阴性群体不能诱导有效的体液和细胞免疫反应。鉴于此,本研究进行了PRRSV流行情况调查,并从2017-2021年间华南部分地区(广西、广东地区)疑似PRRS感染病猪的病料中成功分离到11株PRRSV毒株。通过对阳性样品ORF5基因序列和11株分离株全基因组序列的同源性比对和遗传进化分析,掌握了2017-2021年间华南部分地区PRRSV的流行情况和遗传进化特征。在此基础上,我们分析了2株PRRSV分离株对猪场生产指标造成的影响,测算了PRRS爆发期间母猪头均月断奶仔猪的损失,并进一步计算了由此造成的经济损失。最后,我们分别利用PRRSV弱毒苗和灭活苗开展了相关临床应用试验。我们摸索出了能显著缩短疫苗毒病毒血症的药物保健组合与疫苗接种剂量,并成功应用于后备母猪群的PRRS驯化。我们还利用PRRSV灭活苗成功对1个PRRS阳性不稳定母猪场进行了有效控制。具体研究内容如下:1.2017~2021年华南部分地区PRRSV流行情况调查、毒株分离与遗传进化分析共收集了2017-2021年间6795份疑似PRRS发病猪的病料样品,检测到1279份阳性,阳性率为18.82%。对阳性样品扩增ORF5基因,共获得479条完整的ORF5基因序列。序列比对和遗传进化分析显示,479株PRRSV均属于基因2型,包含HP-PRRSV(lineage 8)、NADC30-like(lineage 1)和QYYZ-like(lineage 3)三种类型的毒株,各自占比分别为85.39%、13.78%和0.84%。在检测到的HP-PRRSV中,93.15%为类疫苗毒株,说明PRRSV弱毒疫苗的大量使用是导致HP-PRRSV具有高检出率的主要原因。对分离获得的11株PRRSV毒株的全基因组序列进行了测定,序列比对分析显示7株为类疫苗毒株。同时,有6株为重组毒株,重组断点主要集中在Nsp2蛋白,其中3株源自NADC30-like毒株与HP-PRRSV的重组,1株为NADC30-like毒株与类疫苗毒株的重组毒株,1株为HP-PRRSV与QYYZ-like毒株的重组毒株,1株为类疫苗毒株、QYYZ-like毒株以及HP-PRRSV的重组毒株。可见,华南地区PRRSV流行毒株复杂多样,并存在大量的基因突变和重组,这无疑给PRRS的有效防控造成了巨大的困难。2.PRRS感染对母猪场生产指标和经济效益的影响我们进一步评估了NADC30-like分离株GX505(A猪场)和GX1858(B猪场)感染后对各自猪场生产指标的影响。指标受影响的持续时间均为4-5个月。列举各场主要指标受影响的情况:A场分娩率下降了5.96%、母猪死亡率升高了30.51%、空怀率升高了53.11%、窝均死胎升高了36.05%、窝均木乃伊升高了48.28%、哺乳仔猪死亡率升高了20.48%,28日龄断奶重降低了10%;B场分娩率下降了5.99%、母猪死亡率升高了68.97%、空怀率升高了58.75%、窝均死胎升高了67.86%、窝均木乃伊升高了69.23%、哺乳仔猪死亡率升高了182.08%,28日龄断奶重降低了5.31%。在此基础上我们测算了PRRS感染期间因断奶仔猪数减少造成的母猪头均月经济损失。A场每头母猪生产的月断奶仔猪减少1.22头,月断奶仔猪总重量减少14.45kg,由此造成的月经济损失为1637.16元。B场每头母猪生产的月断奶仔猪减少1.52头,月断奶仔猪总重量减少15.31kg,由此造成的月经济损失为1734.92元。可见,PRRS感染会严重影响母猪场的生产指标和经济效益。3.弱毒疫苗对PRRSV阴性后备母猪群的驯化效果鉴于PRRSV感染后对猪群的重大影响,我们设计试验摸索PRRSV弱毒疫苗驯化的方案。结果显示:在接种PRRSV弱毒苗(TJM-F92株)14天后,使用茯苓多糖+泰万菌素进行保健可以缩短疫苗毒的病毒血症至6周;PRRSV弱毒苗接种0.5头份比接种1头份时,病毒血症持续时间缩短1周。因此,我们选择0.5头份弱毒苗+茯苓多糖+泰万菌素的驯化方案,并应用于后备母猪群的PRRS驯化。在获得驯化方案的基础上,我们选择了1200头PRRSV阴性后备小种猪开展了驯化试验。试验猪群在各阶段均保持PRRSV野毒阴性,所分娩仔猪也为PRRSV抗原阴性。共542头后备猪转入母猪场,统计了该542头驯化后母猪的主要生产指标,除分娩率(83.76%)、母猪死亡率(4.61%)、哺乳仔猪存活率(91.90%)三项指标因子宫炎、饲料霉变等异常原因未达标外,其他指标均达标。其中,窝均产活仔数13.09头、窝均死胎0.21头、窝均木乃伊0.24头、平均初生重1.3kg、28日龄断奶重7.29kg。这说明该驯化方案能有效的提高后备猪群针对PRRS的特异性保护水平,提高猪群健康度和各项生产指标,具有进一步推广应用的价值。4.灭活疫苗对PRRSV阳性不稳定母猪群的控制效果阳性不稳定母猪群经实验室确诊为HP-PRRSV毒株感染。我们使用商品化PRRSV灭活苗(CH-1a株)对母猪群体进行全群紧急接种,配合药物保健和彻底封群等措施,4个月后,猪场各项生产指标恢复至发病前水平(每头母猪月生产断奶仔猪11.12头),21周开始持续生产PRRSV抗原阴性断奶小猪,说明灭活苗对于阳性不稳定猪群具有良好的控制效果。
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