辅酶Q<,10>，一类脂溶性醌类化合物，以极低的含量广泛存在于动物、植物、微生物等细胞内。作为呼吸链中的递氢体，在生物体中具有重要的生理功能，是细胞内天然抗氧化剂，细胞代谢的激活剂，并能够提高机体免疫力，在临床中有着广泛的用途。本文以热带假丝酵母AS 2.1387为出发菌株，对辅酶Q<,10>高产菌进行了诱变选育，并对其发酵条件，提取工艺进行了各方面的优化，大幅度提高了辅酶Q<,10>的发酵单位，主要研究结果有以下几个方面： 1．研究了紫外线、硫酸二乙酯单因子，以及复合因子对出发菌株的诱变效应，硫酸二乙酯一紫外复合诱变是抗性高产菌育种的最佳诱变方式，其最适剂量为1％的DES处理40min，再经紫外处理60s，致死率与突变率分别为91.5％与2.71％；在营养缺陷型突变菌的选育中，硫酸二乙酯单因子诱变为最佳的诱变方式，最适剂量为1％的DES处理40min，突变率达到2.3％。通过放线菌素D对突变菌进行广谱抗性初筛，并以高浓度前体物质对羟基苯甲酸以及终产物结构类似物维生素K<,3>进行特异性筛选，最终选育得到了一株遗传稳定性良好的辅酶Q<,10>高产突变株APV.12，其发酵产量达到了23.958mg/L，比出发菌株提高了1.76倍。 2．本课题对辅酶Q<,10>高产突变株APV.12进行了一系列的发酵工艺优化，得出最佳发酵培养基组分为：葡萄糖3.5％、酵母膏0.6％、蛋白胨0.4％、(NH<,4>)<,2>SO<,4> 0.1％、玉米粉0.1％、MgSO<,4>-7H<,2>O0.05％、K<,2>HPO<,4>0.05％、KH<,2>PO<,4>0.1％、CaCl<,2>0.1％、NaAc0.2％。研究了对羟基苯甲酸、胡萝卜汁、番茄汁三种添加物质对热带假丝酵母发酵生产辅酶Q<,10>的具体影响，并确定了其最适添加量，各因素的最佳组合为：PHB：0.15％，胡萝卜汁：0.6％，番茄汁：0.4％。 3．通过发酵工艺优化，得出辅酶Q<,10>高产突变株APV.12最佳发酵条件为：温度30℃，pH6.0，接种量6％，250ml锥形瓶中装液量60ml，发酵时间48h。优化后的菌体生物量和辅酶Q<,10>发酵单位均高于优化前，辅酶Q<,10>发酵单位达到了28.102mg/L，比优化前提高了17.3％；APV.12菌株的发酵单位最终比出发菌株AS 2.1387提高了2.24倍。 4．对辅酶Q<,10>的提取纯化工艺进行了各方面的优化，最适提取条件为：浓度2mol/L的氢氧化钠溶液破壁并皂化，皂化温度90℃，回流时间为60min，石油醚萃取后的皂化液中的菌体残渣用丙酮进行再处理；提取工艺优化后辅酶Q<,10>的得率较优化前提高了58.9％；粗提液经硅胶柱层析纯化后，杂质含量减少，纯化样品中辅酶Q<,10>的含量达到98.16％。 5．对辅酶Q<,10>的检测进行了研究，比较了UV法、TLC-UV法与HPLC法三种检测方法的相关性，并对其检测结果进行了验证，确定以UV法作为育种与发酵优化实验中的快速检测方法，可以采用TLC-UV法进行定量分析，其检测结果与HPLC法相差9.2％，在常规实验条件下能够对辅酶Q<,10>的发酵单位进行准确的检测。