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目的观察高糖刺激人足细胞时是否引起Wnt/β-catenin通路激活,及对miR-200a和足细胞标志蛋白nephrinrm表达的影响,初步探讨Wnt/β-catenin通路和miR-200a与足细胞损伤的关系。转染miR-200a-3p mimics至足细胞,检测高糖刺激足细胞不同时间miR-200a、β-catenin、 nephrin的表达变化,观察miR-200a-3p mimics对人足细胞Wnt/β-catenin通路活性的影响及能否减轻足细胞损伤。方法以分化成熟的人足细胞为研究对象,随机分为：正常对照组,25mM高糖分别刺激6、12、24小时组,及25mM甘露醇等渗对照组,采用实时定量PCR方法检测β-catenin、nephrin mRNA以及miR-200a的表达水平；采用蛋白印迹方法测定β-catenin、nephrin蛋白表达水平。将mir-200a-3p mimics转染至分化成熟的足细胞,分组如下：(1)高糖组；(2)转染miR-200a-3p mimics+高糖刺激6h组(3)转染miR-200a-3p mimics+高糖刺激12h组(4)转染miR-200a-3p mimics+高糖刺激24h组(5)转染miR-200a mimics negative contro1+高糖刺激24h组。采用实时定量PCR方法检测(?)β-catenin、nephrin mRNA及miR-200a的表达水平；采用蛋白印迹检钡(?)β-catenin、nephrin蛋白表达水平。结果(1)人足细胞正常培养条件下表达nephrin, miR-200a,表达少量p-catenin。(2)人足细胞经高糖刺激后,β-catenin mRNA和蛋白表达量随刺激时间的延长逐渐上调。甘露醇组β-catenin mRNA表达量与对照组相比差异均无统计学意义。(3)人足细胞经高糖刺激后,nephrin mRNA和蛋白表达量随刺激时间的延长逐渐下调。甘露醇组nephrin mRNA表达量与对照组相比差异均无统计学意义。(4)人足细胞经高糖刺激后,miR-200a的表达量随刺激时间的延长逐渐下调,其中高糖刺激12h和24h组与对照组比较,差异有统计学意义。甘露醇组与对照组相比差异均无统计学意义。(5) miR-200a-3p mimics转染至人足细胞后,miR-200a的表达明显上调。转染miR-200a mimics negative control+高糖刺激24h组miR-200a的表达量与高糖组比较差异无统计学意义。(6)转染miR-200a-3p mimics的人足细胞经高糖刺激不同时间后,β-catenin mRNA和蛋白表达量逐渐下调。转染miR-200a mimics negative control+高糖刺激24h组β-catenin mRNA和蛋白的表达量与高糖组比较差异无统计学意义。(7)转染miR-200a-3p mimics的人足细胞经高糖刺激不同时间后,nephrin mRNA和蛋白表达量逐渐上调。转染miR-200a mimics negative control+高糖刺激24h组mephrin mRNA和蛋白的表达量与高糖组比较差异无统计学意义。结论(1)高糖刺激能使人足细胞Wnt/β-catenin通路激活,足细胞标志蛋白nephrin表达下调。(2)miR-200a在人足细胞有表达,高糖刺激能下调其表达,且呈时间依赖性。(3)Wnt/β-catenin通路及miR-200a可能参与高糖诱导的人足细胞损伤。(4)上调人足细胞miR-200a水平,可抑制高糖诱导的足细胞Wnt/β-catenin通路激活,使足细胞标志物nephrin表达上调从而减轻足细胞损伤。