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目的: 本课题主要探讨人类巨细胞病毒(HCMV)对脐血多向造血祖细胞集落形成单位（CFU-Mix）和巨核系祖细胞集落形成单位（CFU-Mk）形成的影响及作用机制，并用更昔洛韦（GCV）和黄芪(MMR)作用于HCMV感染的CFU-Mix、CFU-Mk，探讨GCV和MMR对HCMV感染所致CFU-Mix、CFU-Mk体外增殖抑制的影响。方法: 1.采用造血祖细胞集落形成分析方法，在体外培养造血祖细胞，以HCMV-AD169株作为攻击病毒，持续感染脐血CFU-Mix、CFU-Mk，观察、计数HCMV-AD169感染后CFU-Mix、CFU-Mk集落数、集落抑制率、集落峰期及维持时间。2.采用Giemsa-Wright和过氧化物酶染色法鉴定集落细胞成分。3.采用MTT法分别检测MMR和GCV对脐血单个核细胞的细胞毒性作用，以确定造血祖细胞对MMR和GCV的最大耐受浓度(MTC)。4.在1：10HCMV组中，将GCV和/或MMR作用于HCMV-AD169感染后的CFU-Mix、CFU-Mk，分别计数其集落数、集落增殖提高率、集落峰期及维持时间。5.用PCR和荧光定量PCR 技术检测CFU-Mix、CFU-Mk集落细胞内HCMV-AD169 DNA。结果：1．经MTT法测得造血祖细胞对MMR和GCV的最大耐受浓度(MTC) 分别为50μg/ml和7.5μg/ml。2.与空白对照组比较，灭活对照组CFU-Mix和CFU-Mk集落无明显减少，差异无统计学意义。与空白对照组和灭活对照组比较，1：10、1：100、1：1000 HCMV感染组CFU-Mix、CFU-Mk集落数均明显减少，集落维持时间缩短，且呈剂量依赖关系，病毒感染浓度越高，CFU-Mix、CFU-Mk集落数下降幅度越大，集落维持时间缩短越明显，差异有统计学意义。但对各浓度组集落出现高峰的时间无明显影响。1：10、1：100、1：1000 HCMV感染组与灭活对照组比较，CFU-Mix集落抑制率依次为55.2％、35.1％、20.3％，CFU-Mk集落抑制率依次为46.7％、29.7％、14.5％。3.用PCR和荧光定量PCR在CFU-Mix、CFU-Mk集落细胞内均检测到有HCMV-AD169 DNA存在，而空白对照组和灭活对照组则为阴性。4.在1：10 HCMV组中加入MMR和/或GCV后, CFU-Mix、CFU-Mk集落数与1：10HCMV组比较均有明显增加，集落维持时间延长，差异有统计学意义。但各浓度组集落出现高峰的时间差异无统计学意义。荧光定量PCR检测发现，在1：10HCMV组中加入MMR和/或GCV后, CFU-Mix、CFU-Mk集落细胞内HCMV-AD169DNA copies有下降趋势。MMR和GCV联合应用较单用药组作用更加明显。结论：1.多向、巨核系造血祖细胞是HCMV-AD169的主要靶细胞之一，在体外HCMV-AD169对多向、巨核系造血祖细胞的增殖、分化和集落形成有明显抑制作用。2.HCMV能直接感染多向、巨核系造血祖细胞，并使之受到损伤，此作用可能与临床HCMV感染患儿出现贫血、粒细胞减少及血小板减少有关。3.在体外黄芪和更昔洛韦在祖细胞水平均有抗HCMV的活性，能有效地促进HCMV感染后增殖受到抑制的多向、巨核系造血祖细胞再增殖，两者联用能产生协同的抗HCMV作用。提示临床抗HCMV感染可试用黄芪。