牛至抗氧化活性及抗炎作用研究

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目的:通过对牛至(Origanum vulgare L·)的体外抗氧化活性和抗炎、止咳、祛痰作用进行主要药效学评价并探讨其体外抗炎作用机理,为牛至的临床应用及其进一步研究提供参考。  方法:(1)将不同浓度的牛至水(醇)提取物作为实验组,以VC作为对照组,通过DPPH·自由基、羟基(·OH)自由基清除能力及铁离子还原能力测定实验,评价其体外抗氧化活性并对其进行总酚和总黄酮含量测定。(2)分别取昆明种小鼠50只,按体质量随机分为空白对照组(0.9%生理盐水)、阳性对照组(急支糖浆5.0mL/kg)、牛至水(醇)提取物低、中、高剂量组(1.35、2.70、5.40)g/kg,通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验、氨水致咳试验及气管酚红排泌试验,观察其抗炎、止咳、祛痰作用;(3)通过LPS诱导RAW264.7巨噬细胞炎症模型上用牛至水提物进行干预,以ELISA方法检测TNF-α、MCP-1、PGE2、NO及IL-6的表达量,采用qPCR的方法检测TNF-α,IL-6,MPC-1的mRNA表达水平。  结果:(1)牛至水、醇提取物具有较显著的DPPH·自由基、(·OH)自由基清除能力和铁离子还原能力,差异有统计学意义(P<0.05)。其中牛至提取物浓度为2mg/mL时,水提物对DPPH·自由基清除率高于相同浓度的VC,而醇提物清除DPPH·自由基的能力接近于相同浓度的VC;牛至各浓度提取物对(·OH)的清除能力和铁离子还原能力均小于浓度为0.1mg/mL的VC。牛至水提物中总黄酮和多酚含量分别为25.2μg/mg、4.057μg/mg,牛至醇提物中总黄酮和多酚含量分别为46.92μg/mg、8.16μg/mg;(2)与空白对照组比较,牛至水、醇提取物均能抑制二甲苯引起的耳肿胀,能延长其咳嗽潜伏期、减少咳嗽次数及促进酚红排泌,差异有统计学意义(P<0.05)。其中高剂量组的效果更显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)LDH结果表明,牛至水提物高剂量组对于细胞有毒性作用,但是低、中剂量组对细胞无毒;牛至水提物三个剂量组对LPS诱导PGE2的升高均有显著抑制作用(P<0.05),并均使NO的表达量上调(P<0.05)。对于LPS诱导的TNF-α升高以及TNF-α的mRNA表达,其低、中剂量组具有抑制的效果(P<0.05)。2.5mg/mL的浓度对LPS诱导的IL-6、MCP-1的升高及其mRNA表达具有明显的抑制作用(P<0.05)。  结论:牛至具有较显著的抗氧化活性及抗炎、止咳、祛痰作用,其抗炎作用机理可能与抑制PGE2、IL-6、MCP-1、TNF-α的生成有关。
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