目的：阿片类药物的预适应作用可减轻多种细胞缺氧/复氧损伤。然而阿片类药物的延迟预适应是否对缺氧/复氧的肺动脉内皮细胞有保护作用目前尚未可知。本实验旨在发现吗啡延迟预适应对缺氧/复氧的肺动脉内皮细胞是否有保护作用,及发现其可能机制。 方法：体外培养的猪肺动脉内皮细胞在缺氧/复氧前24h预先给予0.9％盐水或吗啡(1μm),然后缺氧16h,复氧1h。取细胞及细胞培养液进行相关的指标检测。为发现吗啡延迟预处理的保护作用机制,非选择性KATP阻断剂格列苯脲(Glib;10μM),一氧化氮合成酶抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME;100μM)及阿片受体阻断剂纳洛酮(Nal;10μM)在缺氧/复氧前30 min加入到培养液中。采用原位末端标记法(TUNEL)以及Annexin V-FITC/PI双荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡。采用Real-time PCR检测eNOS、caspase-3、ICAM-1、等基因mRNA表达的差异。本实验还比较了细胞培养液中NO、ET-1、MDA和SOD含量的差异。 结果：与给予0.9％的盐水比较,吗啡可减少遭受缺氧/复氧损伤的猪肺动脉内皮细胞凋亡(18.1±1.9％vs.5.5±0.3％；P<0.05)。促使内皮细胞释放NO(11.4±1.3μM vs.20.5±2.1μM,P<0.05),上调内皮细胞eNOS的mRNA水平,减少ET-1的释放,降低MDA含量和增加SOD含量。在细胞缺氧/复氧前30 min给予Glib、L-NAME和Nal均可消除吗啡抗肺动脉内皮细胞凋亡的作用,细胞培养液中MDA和ET-1升高而SOD含量降低。L-NAME和Nal还消除吗啡促进内皮细胞分泌NO的作用。 结论：吗啡的延迟预适应可减轻肺动脉内皮细胞的缺氧/复氧损伤后的凋亡,减少ET-1分泌,减轻脂质过氧化损伤。这种保护作用可能是吗啡与阿片受体结合后促进内皮细胞释放NO,NO通过相应的细胞内信号转导机制并最终激活KATP通道发挥保护作用。