本试验对采集于华南农业大学野生稻核心收集圃(Wild Rice Core Collection Nursery，South China Agricultural University)的两种野生稻---广西石桥药用野生稻和广西横江药用野生稻内生固氮菌进行了分离，共得到内生固氮菌(乙炔还原法测定及nifH片段扩增)35株。通过SDS-PAGE全细胞蛋白电泳和IS-PCR对获得的菌株进行聚类分析。在此基础上，对各类群的代表菌株作了以下工作：16S rDNA全序列分析，以确定菌株的系统发育；各菌株的生理生化特征；在不同环境因子(温度、酸碱度、渗透压、铵离子以及碳源)下固氮菌株的固氮特性；植物生长激素(IAA)分泌的测定；溶磷和回接试验。得出以下结论： 1．内生固氮菌的筛选：结合乙炔还原法测定及，nifH片段扩增，从广西石桥药用野生稻、广西横江药用野生稻中共分离得到内生固氮菌35株。其中，从根中分离到16株，占45.71％，茎中分离得到10株，占28.57％，叶中分离到9株，占25.71％。各菌株表现出的固氮活性差异很大，从最低的492.36 nmol C<,2>H<,2>/mL/h(x32)至最高的1382.13 nmol C<,2>H<,2>/mL/h(x1)。 2．聚类分析及系统发育：通过SDS-PAGE全细胞蛋白电泳和IS-PCR，将35个菌株聚为5个不同类群，且各个类群在蛋白电泳和IS-PCR电泳图谱上表现出极大的相似性。通过16S rDNA全序列分析知，3个类群的菌株(x2、x7、x34)与Enterobacterasburiae相似性分别为97％、96％和97％。x1和x23与Klebsiella pneumoniae和Burkholderia cepacia相似性均为99％。其中，x7与模式菌株Enterobacter asburiae的相似性只有96％，可能是一个新种。 3．各菌株固氮特性：对5个类群的代表菌株环境因子适应试验，测定其在不同环境条件下的固氮活性，结果表明：各菌株在30至35℃，pH 7～8，低浓度(0.25％左右)NaCl，0.5 mmol NH<,4>Cl且以蔗糖为碳源条件下，各菌株均能表现出较好的固氮活性。在菌株开发利用时，这可以作为固氮菌肥生产的一个参考指标。 4．生长素分泌与溶磷能力测定：5个被测菌株均能表现出一定的分泌植物生长素(IAA)能力，其中，以x2的分泌能力最强，为69.18 μg/mL，x1其次，17.34μg/mL为，x23最差，为6.64μg/mL。在溶解无机磷和有机磷的试验中，x2的溶磷效果最好，其溶解无机磷的量为33.58μg/mL，x27的效果最差，为0.08μg/mL。 5．回接： A．侵染试验：用带有荧光质粒的x2gfp浸种，待水稻生长14天，对其表面灭菌，研磨各组织(根、茎、叶)后，涂板(加底物)，结果发现根和茎所对应的平板上有带荧光的菌落长出，进一步的PCR扩增确定，该PCR产物就是经转化的荧光质粒所携带的GFP片段。 B．试管培养：在不添加其它营养物质的条件下，比较水稻生长前期根的生长状况时，结果发现：由固氮菌浸泡过的试验组水稻根均比对照组的生长更好。其中x34对水稻根长的促进效果最为明显，较对照平均增长122.09％，其次是x23，为81.74％，最差为x2，为62.96％。 C．盆栽：在以无氮营养液浇灌下，人工气候箱内培养14天的水稻生长来看：浸种的试验组在根长和株高上均优于对照组。其中，x34在促进水稻根长生长上优势最为明显，其平均根长比对照增长76.19％。在促进水稻株高生长方面，x23最为明显，其平均株高比对照长35.91％。