β-葡聚糖对暗纹东方鲀非特异性免疫及生长性能的影响

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β-葡聚糖是一种从酵母细胞壁中提取的葡萄糖的聚合物,因为和大多数病原菌有着相类似的结构,目前已经作为一种新型、绿色的天然免疫增强剂应用在水产养殖中。目前已有实研究整实,在给予葡聚糖之后,鱼体内的非特异性免疫反应以及体液防御系统会有不同程度的提高,以此来增强鱼体对不同病菌的抵抗能力如,对南亚野鲮(Labeo rohita)、亚洲鲶鱼(Silurus asotus)等给予不同剂量的β-葡聚糖,血清溶菌酶活力、白细胞吞噬活性等与非特异免疫相关的指标均有明显的上升。但也有一些研究显示,如对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)、尼奥罗非鱼(Oreochromis aureu)、斑点叉尾鲴(Ietalurus punetaus)等鱼类投喂β-葡聚糖,非特异免疫功能没有得到增强。甚至有报告长时间连续投喂β-葡聚糖导致鲑鱼(Atlantic salmon)和南美白对虾(Penaeus vannamei boone)的免疫功能免疫抑制现象。这说明,β-葡聚糖的免疫增强效应可能存在着种间差异,给予方式也可能影响β-葡聚糖的效应,能否广泛的作为水生生物的免疫添加剂还需要大量而细致的研究,为此本文通过三个相互关联的实验来研究β-葡聚糖是否可以用做暗纹东方鲀的免疫增强剂而投入到生产上,以此来推动暗纹东方鲀产业健康蓬勃的发展。1.β-葡聚糖对暗纹东方纯非特异性免疫功能的影响为研究β-葡聚糖是否可以提高暗纹东方鲀非特异性免疫功能以及β-葡聚糖在幼鱼机体内的作用时间。选取体质量约50g的幼鱼600尾,随机分为5组,每组40尾鱼,每组设3个重复,分别按照每尾鱼Omg/kg、10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg腹腔注射β-葡聚糖,并在注射后4h、8h、12h、24h、2d、3d、5d、7d、9d检测血清相关非特异性免疫指标的变化情况。结果显示:对腹腔注射β-葡聚糖之后,与对照组相比,实验组除C3补体外,血清溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、血清总蛋白(STP)的水平出现不同程度提高(P<0.05)。且由β-葡聚糖所引起的免疫增强效应可维持3-4d。这表明β-葡聚糖可以起到提高暗纹东方纯免疫性能的作用,。2.β-葡聚糖对暗纹东方纯抗单胞嗜水杆菌感染能力的影响取暗纹东方纯幼鱼420尾,随机分为7组,每组20尾鱼,每组3个重复。选取体质健康、长势均匀的暗纹东方纯幼鱼420尾,随即分为7组,每组三个重复,每个重复20尾鱼。对照组仅注射生理盐水;实验组分两组,一组在感染前1d分别按Omg/kg,1Omg/kg,20mg/kg,40mg/kg,80mg/kg (β-葡聚糖/鱼体重)给予β-葡聚糖,p-葡聚糖用鱼用生理盐水稀释,每尾鱼的注射总剂量为0.1mL;另一组在感染前5d按40mg/kg给予β-葡聚糖。所有实验组按每kg体重5mL逐尾注射嗜水气单胞菌悬液(1.72×108CFU/mL),记录1、3、5、7、9d暗纹东方纯的累计死亡数,计算存活率。结果显示:1d后注射嗜水气单胞菌悬液各实验组鱼相继出现死亡,3d后,实验组的存活率显著低于对照组(P<0.05)。实验组中,经β-葡聚糖强化的各组存活率较未强化组显著提高。随着攻毒时间的推移,各实验组鱼类死亡数在增加。至9d时,未作处理的组试验鱼存活率为93.3%,注射嗜水气单胞菌悬液各实验组存活率最高为41.7%,其中未注射葡聚糖的实验组仅为16.6%,显著低于强化组。而注射β-葡聚糖的强化组之间,存活率虽有差异,但差异不显著。这表明,β-葡聚糖可以作为暗纹东方纯的免疫增强剂以抵抗外界病菌对鱼体的感染。3.β-葡聚糖给予方式对暗纹东方纯非特异性免疫功能和生长性能的影响取暗纹东方纯幼鱼300尾,随机分为5组,每组3个重复并进行β-1,3葡聚糖投喂实验。对照组投喂不加β-1,3葡聚糖的河豚基础饲料,实验组Ⅰ-Ⅲ分别连续投喂添加葡聚糖含量为0.1%、0.2%、0.4%的基础饲料。实验组IV间断投喂葡聚糖含量为0.2%的基础饲料。56d后,检测非特异免疫指标以及生长性能指标的变化情况。结果显示:在本试验中,采取投喂的方式对暗纹东方纯进行β-葡聚糖的施用,56d之后,试验组和对照组相比,增重率、饲料系数、存活率等生长指标并没有因为β-葡聚糖的的添加量以及投喂方式的不同而有所差异,但实验组和对照组相比,免疫性能均有显著上升,但免疫提升效果低于注射方式。这表明,β-葡聚糖对提高暗纹东方纯生长性能没有作用,采用间断投喂和连续投喂的方式所引起的免疫增强没有差异,为避免潜在的免疫抑制的发生以及降低养殖成本,建议在生产上采用间断投喂的方式。综上所述,本论文通过三个实验研究了β-葡聚糖可以有效的提高暗纹东方纯的免疫性能并在机体内存在一定的作用时间。除此,β-葡聚糖对病菌的感染也有一定的抵抗作用。但以投喂方式给予β-葡聚糖所引起的免疫增强效果略低于注射方式,而且采用间断投喂和连续投喂方式均不能对暗纹东方纯的生长性能造成影响。
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