广西民族药当归藤化学成分及其质量分析研究

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tyybj2008
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目的:对广西民族药当归藤进行化学成分研究,并对其进行质量分析、急性毒性试验和抗凝血实验研究,为更好地开发和利用当归藤药材资源做好前期准备,为后续的质量标准、制剂、临床等研究工作提供科学依据。  方法:化学成分研究方面:首先对当归藤进行化学成分预试,然后采用系统溶剂提取分离法得到不同极性的当归藤提取部位,再用硅胶柱层析分离法对石油醚部位和乙酸乙酯部位进行分离纯化,得到的单体运用MS、1H-NMR和13C-NMR等技术进行结构鉴定。此外,还对当归藤不同部位进行挥发油成分GC-MS分析;质量分析方面:首先对当归藤进行显微鉴定,然后用UV-Vis法测定其总黄酮含量,并用正交设计优选最佳提取工艺,再用HPLC法测定其儿茶素含量;药效筛选方面:对当归藤进行急性毒性试验及抗凝血实验研究。  结果:化学成分研究方面:化学预试验结果表明当归藤中可能含有糖类、苷类、酚类、鞣质、皂苷、有机酸类、黄酮类、三萜类、甾体类、挥发油及油脂等成分。从石油醚部位和乙酸乙酯部位分离纯化得到7个单体,鉴定了其中5个化合物的结构,分别是:2-二十七烷酮、十五烷酸-十五烷酯、β-谷甾醇、4-正癸基苯甲酸、豆甾醇。从当归藤根、茎、叶挥发油中分别鉴定出11、36、74个成分,分别占挥发油总量的77.67%、92.88%和85.11%;质量分析方面:当归藤有显著的显微特征,根的皮层有单个石细胞散在,在中柱部位有较多石细胞群及纤维束散在并断续成环。茎的韧皮部宽广,在靠近形成层部位有大型的分泌细胞散在,在射线部位有石细胞群。当归藤的薄层色谱中,儿茶素斑点清晰,在与对照药材色谱图相应位臵上显相同颜色的斑点。当归藤总黄酮最佳提取工艺为50%乙醇100ml加热回流提取2h,并测得总黄酮平均含量为11.77%。HPLC法测定当归藤中儿茶素的含量最佳色谱条件为检测波长280nm、流动相甲醇-0.5%冰乙酸(15∶85)、流速为0.80ml/min,结果表明儿茶素峰面积在进样量为0.26μg~1.35μg之间呈良好的线性关系y=1118x+4.663,r=0.9997,平均加样回收率为98.26%,RSD为2.7%,其中广西金秀产含量最高;药效筛选方面:当归藤水提取物和醇提取物的毒性都很小,最大耐受量倍数相当成人用量的150倍。醇提取物低剂量有抗凝血作用。结论:本研究首次从当归藤中分离得到2-二十七烷酮、十五烷酸-十五烷酯、β-谷甾醇、4-正癸基苯甲酸、豆甾醇等化合物,并首次对当归藤不同部位进行挥发油成分GC-MS分析,为阐明当归藤药理作用提供物质基础。首次对当归藤药材进行了生药学和TLC鉴别研究,结果可作为鉴别药材真伪的参考依据。首次采用儿茶素指标,对其进行含量测定研究,为控制当归藤药材及其制剂的质量提供理论依据。首次对当归藤进行急性毒性实验及抗凝血试验研究,为科学评价当归藤的安全性及药效提供理论依据。
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