冬虫夏草菌丝体培养及其抗氧化物提取研究

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冬虫夏草Cordyceps sinensis (Berk) Sacc.为我国传统名贵滋补药材,在增强人类免疫系统和抗癌方面有着显著的功效。冬虫夏草主要提取物虫草多糖,可清除人体自由基,帮助人体延缓衰老,在保健药品和高级化妆品领域需求广泛。可是天然冬虫夏草产量稀少,价格昂贵,难以满足工业化生产的需要。本文主要研究了冬虫夏草菌丝体的液体深层发酵培养以及虫草多糖的提取方式,并重点对超声波法提取虫草多糖进行了改进,为进一步开发和利用虫草多糖奠定基础。1、本文采用正交实验确定了冬虫夏草菌丝体的最佳培养条件:培养周期为7-8天,培养温度为24-26摄氏度,ph为6.0-7.0之间,葡萄糖浓度为30g/L,蛋白胨浓度为10g/L,磷酸二氢钾的浓度为0.3g/L,冬虫夏草菌丝体和胞外多糖的产量最高,菌丝体的产量为18.39g/L,胞外多糖的产量为3.96g/L。2、分别对热水浴提取法和超声波提取法进行正交实验,筛选出最佳提取条件,正交实验所得的最佳提取条件下,超声波法提取菌丝体多糖同热水浴法提取多糖相比,超声波法的提取时间比热水浴法缩短了96%,多糖提取率升高了2.9%。对所得多糖的抗氧化性进行分析,热水浴法提取所得虫草多糖对羟基自由基的清除率分别是68.24%、70.23%、69.66%,其平均清除率为69.38%;超声波法提取所得虫草多糖对羟基自由基的清除率分别为59.48%、60.23%、58.78%,其平均清除率为59.50%。3、在超声波法提取虫草多糖的基础上,向提取液中添加适量的碘化钾,以起到保护虫草多糖抗氧化活性的目的。在虫草多糖浓度为5mg/ml条件下,未加入碘化钾的对照组在超声法提取下,其提取所得的虫草多糖对羟基自由基的清除率分别是58.61%、60.22%、59.38%,其平均清除率达到了59.40%,提取液中加入碘化钾之后,进行超声波法提取,三组重复所得虫草多糖对羟基自由基的清除率分别是64.81%、63.59%、65.36%,其平均清除率达到了64.59%。结果表明,在超声波法提取虫草多糖过程中添加碘化钾作为保护剂可以有效的提高虫草多糖的抗氧化活性,使之对羟基自由基的平均清除率由59.50%提高到了64.59%,这一结果为虫草多糖的工业化提取提供了一定的参考依据。
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