背景我国是食管癌高发国家,以华北晋、冀、豫太行山地区死亡率最高,其次以江苏、福建、四川等省受害也甚大。迄今,其确切病因和机制仍不十分清楚。在食管癌早期病变的发生、发展过程中,癌前病变是一个活跃、不稳定的发展阶段,具有双向转归的特性,已引起广泛关注。食管粘膜卢戈氏染色是发现早期食管癌及癌前病变的有效方法。如何在内镜下检出早期病变,并经病理和现代分子技术及时确定早期食管癌及癌前状态,对食管癌的预防、早期诊治和预后具有重要意义,也是近年来临床病理研究的热点。目的本研究应用内镜卢戈液染色法联合活检组织COX-2、VEGF-C、EGFR、ki-67、P63蛋白检测,旨在分析与食管癌发生发展相关的多个基因蛋白在癌变不同阶段的表达状况、色素内镜检查与病理结果之间的相关性、以及各基因蛋白之间的相关性,从食管癌的发生、血管、淋巴管生成和细胞增殖等多方面探讨癌前病变的分子机制和癌变的早期分子事件,为食管癌前病变和早期癌的诊断提供新的科学依据。方法1.内镜下纵观食管粘膜全貌,细致观察局部微细形态变化,采用1.25%卢戈氏液染色,记录食管粘膜着色情况、部位、边缘、范围等。染色后显色模式分为四级(标准参照Masaki法),按照标准记录归类。2.活检组织10%福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,进行组织学诊断,根据其异型性程度和(或)累及范围分为低级别上皮内瘤变和高级别上皮内瘤变及早期癌。3.从内镜食管卢戈氏液染色检查1879例中,随机化选择病理结果早期癌64例、高级别上皮内瘤变34例、低级别上皮内瘤变35例,并选取正常(非瘤变组)13例做对照,通过免疫组织化学染色法检测COX-2、VEGF-C、EGFR、ki-67、P63的蛋白表达。4.将内镜染色分级、组织学诊断及基因蛋白表达检测结果进行统计学分析。结果(1)食管粘膜卢戈氏染色肉眼观察的图像级别,与病理诊断结果之间存在显著的负相关关系,即随着食管染色级别的降低,组织学病变程度加重。(2)病理分级各组间COX2、VEGF-C、GEFR、Ki67、P63表达量构成比均有统计学差异。病理分级与上述各蛋白的表达存在正相关关系,随着病理分级的增高,COX2、VEGF-C、GEFR、Ki67、P63蛋白表达量也增高。VEGF与EGFR、Ki67、P63蛋白表达量、EGFR与Ki67蛋白表达量、Ki67与P63蛋白表达量均存在正相关关系。结论(1)内镜辅以染色卢戈氏液技术及病理检查已成为当今发现、诊断食管癌前病变的最佳方法,准确可靠,克服了内镜取检的随意性和盲目性,为癌前病变的进一步研究起到最基本保障作用。(2)在食管癌早期病变中,随着食管上皮病变的加重,Cox-2阳性表达率和表达强度呈上升趋势,提示Cox-2是食管癌病变过程的一个早期分子事件,其蛋白的表达在食管上皮癌变过程中可能起着重要作用。(3)VEGF-c在活检组织中表达量的增加与病理分级程度呈正相关关系,可以提示细胞的恶性分化趋势或程度,可能作为食管早期癌发生的预警指标之一。(4)EGFR表达增强是食管癌早期病变发生发展过程中的分子事件,在活检组织中EGFR蛋白表达量呈中、强度表达,预示可能进入癌前病变的发展阶段,成为上皮内瘤变的预测指标。(5)Ki67在正常食管粘膜中不表达或低度表达,而在低级别瘤变中Ki67表达量与正常粘膜表达已有统计学差异,提示Ki67可作为食管癌前病变的生物学指标。(6)P63表达量在上皮内瘤变及早期癌阶段呈中等度或强度表达,预示病变进展至癌前病变的阶段,可作为食管癌前病变的生物学指标。(7)VEGF表达量与EGFR、Ki67、P63表达量、EGFR与Ki67表达量、Ki67与P63表达量均存在正相关关系,说明食管癌早期病变中存在着多因素、多基因的协同作用的机制。本研究结果显示, EGFR与VEGF-C、Ki-67、P63,尤其是VEGF-C、Ki-67与P63的联合检测对于预测上皮内瘤变的发展趋势及良恶性疾病的鉴别具有重要的意义。