神经生长因子对大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合调控作用的实验研究

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背景和目的: 国内外研究表明神经生长因子(NGF)对创面炎症反应及组织重建有着明确的作用,主要可能通过以下几个环节起作用:①起类似炎症趋化因子的作用,聚集炎症细胞(中性粒细胞,巨噬细胞,肥大细胞,淋巴细胞),加速创面愈合过程。②促进肥大细胞脱颗粒。肥大细胞分泌多种化学因子、多肽生长因子,这些因子对创面血管新生、胶原产生及再上皮化起着非常重要的调节作用。③加速皮肤微血管内皮细胞生长,促进创面血管再生。□促进成纤维细胞的迁移、增生、胶原代谢以及向肌成纤维细胞转化、胶原收缩等的影响。本实验旨在探讨NGF对大鼠深Ⅱ°烧伤创面愈合的影响及其调控机制,为临床应用提供实验依据,同时寻求最佳给药方式。 方法: 250-300gSD大鼠32只,在氯胺酮腹腔注射100mg/kg麻醉后,用10%硫化钠脱毛,用100℃电烙铁接触烫其背部,时间为11s,制成直径为1.5cm的圆形深Ⅱ°烧伤创面(病理切片证实),每只大鼠共制6个创面,将烫伤后大鼠随机分4组,即等渗盐水外敷A组为对照组,NGF创面局部外敷B组、创底注射C组和肌注全身用药D组为实验组,每组8只,共用药7天。烧伤后第3、5、7、9天在氯胺酮麻醉下切取创面组织,制成HE染色常规切片及VEGF,VEGFr,SMA免疫组化切片,进行光镜组织学观察、照相,计算机图像分析、定量测定;观察创面愈合所需时间;进行数据统计分析。 结果: 实验组创面平均愈合时间较对照组愈合时间缩短0.5-2天,实验组中B组创面愈合时间天数明显低于对照组A组,统计学意义显著,p<0.005。烧伤后3、5、7、9天HE常规病理切片显示实验组创面及真皮层中炎症细胞、成纤维细胞大量浸润,新生微血管丰富。烧伤后第9天实验组,特别是NGF局部外敷组创面上皮细胞增生活跃,细胞层数多,上皮化明显,新生上皮下有大量胶原沉积。而对照组中创面上皮化不明显,胶原沉积少,真皮层中炎症细胞、成纤维细胞和新生微血管也相对较少。免疫组化检查发现创面组织中主要由炎症细胞、成纤维内皮细胞和血管内皮细胞表达VEGF、VEGFr,发现实验组较对照组表达密度高,对VEGF的上调作用对照组A组与实验组B、C组统计学意义显著P<0.05。特异性平滑肌肌动蛋白SMA免疫组化检查发现实验组微血管内皮细胞增生较对照组活跃,微血管密度更高。 结论: 1、NGF趋化创面炎症细胞浸润,促进成纤维细胞聚集和胶原沉积,加速创面血管新生,改善局部血液循环;促进创面上皮细胞增生,加速上皮化,故能加速大鼠深Ⅱ°烫伤创面的愈合。2、在创面局部外敷、创底注射和肌注全身用药等三种给药途径中,创面局部外敷是一种相对比较有效而简便的给药方式。
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