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金属硫蛋白(Metallothionein, MT)是由动植物和微生物产生的一类低分子量、富含半胱氨酸残基、具有金属结合能力的多肽,具有多种生物学功能,涉及生物有机体生长、发育等各个阶段。近年来,MT由于其独特的生理学功能,使得它的研究和应用已经涉及到农业、环境、生物工程、医药、保健等诸多领域,其中利用MT积累大量重金属的特性已成为大家关注的热点。锌(Zn)作为一种必需的微量元素参与生物体内许多酶促反应过程,是维护生命的重要营养元素,但当其过量时又会产生重金属的毒害作用。MT可以与重金属Zn螯合从而降低毒性,提高植物对重金属锌的耐受性,在解除重金属Zn毒害方面具有重要意义。本研究通过组成型启动子CaMV 35S调控人类金属硫蛋白基因HsMT1L在番茄植株中的表达,研究转基因番茄植株对重金属Zn2+的耐受性,为今后获得富锌的或超富集Zn2+的番茄新材料奠定基础。主要研究结果如下:1成功构建了含35S-Ω::HsMT1L基因的载体pVCT2269通过对载体pVCT2259和pCAMBIA1301分别进行酶切并回收目的片段,过夜连接后将连接产物转化大肠杆菌感受态细胞,获得含有35S-Ω::HsMT1L基因的载体pVCT2269=2获得了整合有35S-Ω::HsMT1L基因的转基因番茄新材料采用农杆菌介导的遗传转化方法,成功将35S-Ω::HsMT1L基因导入番茄基因组,获得了转基因番茄植株。3转35S-Ω::HsMT1L基因的番茄植株提高了番茄对Zn2+的耐受性通过1.2 mmol/LZnS04处理,野生型与转基因番茄植株株高、叶片、根部等表型变化,表明转HsMT1L番茄植株提高了番茄对重金属Zn2+的耐受性。ZnSO4处理下,番茄植株地上部分和根部Zn2+含量比对照均有明显的增加,但转基因番茄地上部分和根部Zn2+含量的增加比野生型高9.5%和28.7%。转基因番茄C、J两株系的根部Zn2+浓度与野生型相比差异分别达到了极显著和显著水平。表明转基因植株根部对Zn2+有明显的富集作用。