急性肺损伤肺组织NF-κB表达的变化及PGE1对急性肺损伤的保护作用

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一、背景 各种感染、脓毒症、严重的创伤等都可导致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)/急性呼吸窘迫综合症(acute respiratory distress syndrome,ARDS),由于局部(肺部)或其它脏器(系统)炎症反应严重失调导致肺泡上皮细胞和血管内皮细胞屏障损伤,急性炎症和富含蛋白的肺水肿。严重的ALI或ALI的最终严重阶段被定义为ARDS。我们对ARDS病理生理和病理学的研究已经有了很大的进步,但目前在临床上对ARDS的治疗仍然面临很大的挑战。在临床上治疗ALI除机械通气效果较明确外,尚无其他较为有效的治疗手段,尤其是药物治疗方面,其死亡率几十年来一直居高不下(约40%),因此开发新的有效的药物治疗已成为危重病医学的一个重要课题。 脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)可导致急性肺损伤,由于它能增加浙江大学硕士学位论文肺泡毛细血管的通透性,活化巨噬细胞,使中性粒细胞渗出而损伤肺实质。各种急性炎症反应性疾病都可以导致肺部的这种反应。核因子KB(NF一KB)对细胞内信号转导起关键性的作用,介导细胞对各种炎症反应的刺激,如紫外线,LPS,细菌或病毒的产物,细胞因子(TNF、IL一1等)和一些治疗药物。NF一KB能够调节包括细胞因子,化学因子,粘附因子和凋亡因子在内的许多基因的表达。NF一KB在胞浆内与抑制分子 1 KB结合在一起,阻止它进入核内。当细胞接受刺激后,工KB被磷酸化降解,NF一KB被释放进入核内,与目标基因增强子结合调节基因的表达。 已经证实前列腺素E1(PGEI)能够减轻ALI/ARDS时的肺部损伤。它的这一保护作用来源于血管扩张的特性,它使得急性肺损伤的过程中血流重新分配。另外,PGEI还可能通过激活3’,5’环磷酸腺昔(cAMP)依赖的蛋白激酶促进肺部的保护作用。cAMP依赖的蛋白激酶可以减少内皮细胞的通透性,阻止中性粒细胞的粘附和血小板的聚集。二、目的 探讨在体实验中LPS诱导的急性肺损伤与NF一KB信号转导之间的关系,PGEI对ALI鼠模型NF一。B活化的调控作用,PGEI对细胞因子表达的调控作用,以阐明PGEI对ALI的保护作用机制。三、方法 雄性S一D健康大鼠45只随机分成3组,A:生理盐水组,B:LPS模型组,C:LPS+1 ipo一PGEI治疗组,各组分1、2、4h三个时间点各5只观察呼吸频率有无变化,有无紫纷,肺组织变化,肺泡灌洗液(BALF)细胞计数和分类,ELISA法测血清细胞因子IL一lp、TNF一a、IL一12、IL一10浓度;Wester.blot测肺组织核蛋白NF一KB表达的变化。
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