人凝血因子Ⅶ(human coagulation factorⅦ，hFⅦ)是一种维生素K依赖的单链糖蛋白，在体内凝血过程中发挥着重要的作用。重组人活性凝血因子Ⅶ(rhFⅦa)在血管损伤处与组织因子结合产生足够的凝血酶，从而触发凝血瀑布。1999年，rhFⅦa由美国FDA批准上市(NovoSeven)，主要适应症是存在FⅧ和FⅨ抑制物的血友病、先天性和获得性FⅦ缺乏症等。最近的临床研究表明，rhFⅦ对血小板减少症和血小板功能障碍、严重创伤、大面积外科手术的止血具有令人满意的止血效果。FⅦ用于全身止血几乎没有毒副作用，为FⅦ的发展和应用展现了极为良好的前景，对战伤救治具有极为重要的应用价值。本实验首先对FⅦ在哺乳动物细胞中的表达做了初步的研究。首先从质粒pUC19／FⅦ中用PCR的方法扩增出FⅦcDNA片段，构建表达载体并转染两种不同的细胞：CHO和BHK。浓缩纯化表达产物并进行相关检测。结果表明，获得了稳定表达FⅦ蛋白的两种细胞株，表达产物具有凝血活性，可以被凝血活酶激活。FⅦ在哺乳动物细胞中的表达为我们以后的工作打下基础。在另一项实验中，尝试了FⅦ在巴斯德毕赤酵母中的表达。构建分泌表达载体，转染毕赤酵母GS115并研究表达产物。虽然验证毕赤酵母正确表达了FⅦ，但是产量低，而且几乎没有凝血活性。这表明毕赤酵母中可能存在翻译后修饰、加工等方面的不足，缺少产生活性FⅦ的一些必要条件。