月季愈伤组织培养及其ETR1 cDNA转化矮牵牛的研究

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为了提供月季无菌苗种质保存的适宜培养基,分析了不同激素组合对月季不定芽增殖的影响;研究了不同因素对不同月季切花品种愈伤组织发生的作用,并且对不同培养时间的愈伤组织进行了显微观测;为了研究月季切花ETR1 cDNA的功能,构建了ETR1 cDNA的反义植物表达载体,并用根癌农杆菌LBA4404转化了矮牵牛.主要研究结果如下:(1)显微观测的结果表明,培养1代的月季愈伤组织细胞体积小,细胞质结构致密,具有成胚潜力;而培养18代的愈伤组织细胞膨大松散,不具备继续分化的潜力.(2)构建了切花月季ETR1 cDNA的两个克隆ETR1D3、ETR1V4的反义植物表达载体pBinETR1D3和pBinETR1V4;并转化根癌农杆菌LBA4404,构建Ti质粒.(3)根癌农杆菌LBA4404转化矮牵牛叶片,pBinETR1D3的转化率为0.53﹪,PCR检测的阳性率为91﹪,初步证明ETR1 cDNA已经整合到矮牵牛的基因组中;RT-PCR检测结果证明,转入的ETR1 cDNA已经在转基因矮牵牛植株中转录;与野生型相比,转基因植株的乙烯敏感性明显降低.
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