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本实验建立了大孔吸附树脂柱层析与高速逆流色谱(HSCCC)相结合的现代分离纯化方法,对环孢菌素A结晶母液中的小组分进行分离纯化,从中分离出三个未报道的由茄病镰刀菌产生的环孢菌素同系物。
采用强酸水解后电喷雾电离质谱的方法对构成环孢菌素的氨基酸特别是1位上的特殊氨基酸进行了定性分析。通过电喷雾电离多级质谱法(ESI-MS)分析对这些环孢菌素小组分的裂解规律进行分析总结,从而建立了简捷有效的初步判断环孢菌素类化合物化学结构的方法。再结合其它结构分析手段,对这三个未报道的由茄病镰刀菌产生的环孢菌素同系物进行化学结构研究,证明其中一个很有可能为已报道的环孢菌素E,另两个同系物的分子量为1188,可能为“新”的天然环孢菌素类化合物,初步判断分别为3位和4位去甲基的环孢菌素A或环孢菌素H,其确切的化学结构正在研究中。
对上述三个环孢菌素同系物进行了抗真菌和活性免疫抑制等生物活性检测,并对实验结果进行了分析讨论。