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第一部分OCT1预测胃癌预后及其影响胃癌发生发展的机制目的:OCT1在肠上皮化生和胃癌中高度表达,但其在胃癌发生发展中的机制尚不明确。本研究旨在探讨OCT1在胃癌中的功能及其与预后的关系。方法:我们在配对的正常和胃癌组织中检测了OCT1的表达水平,并用单因素和多因素生存分析研究了OCT1的预后评估价值。OCT1的功能及其影响synbindin表达和ERK磷酸化的机制进一步在体内移植瘤和体外模型中予以阐明。结果:OCT1在胃癌中基因拷贝数放大且蛋白表达上调。独立的队列分析证实OCT1的基因拷贝数放大及过表达的胃癌患者预后更差。OCT1的表达水平联合美国癌症联合委员会分期,具有对胃癌患者预后的更高的预测价值。在胃癌组织中,OCT1的高度表达与ERK信号通路的激活有关。OCT1能反式结合并激活synbindin的启动子区,后者以脚手架蛋白的形式促进MEK对ERK的磷酸化。OCT1激活synbindin的信号进而导致ERK底物ELK1和RSK激活,从而增强细胞增殖和侵袭能力。人体胃癌组织标本的免疫荧光实验进一步确认了OCT1蛋白水平和synbindin表达/磷酸化ERK的显著正相关性。裸鼠的胃癌细胞移植瘤中OCT1的过表达诱导了synbindin和ERK激活,加速了体内环境下肿瘤的生长。结论:OCT1是synbindin介导的ERK信号通路活化的驱动基因,也是胃癌预后判断的潜在标记物。第二部分ASAP3在小鼠中介导胃酸分泌胃酸分泌的失常与多种高发生率的胃部疾病相关,例如胃食管返流病和消化道溃疡。目前临床上最广泛应用的抑制胃酸药物为质子泵抑制剂,但此类药物易产生耐受和抵抗,因此寻找新的抑制胃酸办法迫在眉睫。既往报道提示ASAP3在离体的兔壁细胞胃酸分泌中发挥作用。在本研究中,我们利用体内基因敲除小鼠模型深入挖掘了ASAP3的胃酸分泌方面的功能和作用机理。ASAP3基因敲除的小鼠胃酸缺乏并伴有胃黏膜组织病理学改变。这些小鼠的壁细胞中存在Arf6过度激活、actin结构改变和显著的质子泵运输障碍。与此相应地是,亚显微结构分析还发现,ASAP3基因敲除小鼠壁细胞的顶膜形态发生了明显改变。本研究突显了ASAP3在胃酸分泌中扮演重要角色,且提示ASAP3可作为潜在的抑制胃酸的靶点。