穿梭质粒pSP189/哺乳动物Vero细胞诱变检测系统的研究及应用

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pickbaobei
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究将基于SV40病毒的短暂复制型穿梭质粒pSP189与非洲绿猴肾Vero细胞组成穿梭质粒/哺乳动物细胞诱变检测系统,并将该系统应用于兽药喹乙醇和喹烯酮的诱变性检测。本研究经阳离子脂质体转染法将pSP189质粒转染Vero细胞后,回收质粒转化宿主菌,获得每皿多于50个的转化子和1.9×10-4的自发突变频率,试验结果表明该系统符合穿梭质粒诱变测试系统的要求。本研究用已知的直接阳性诱变物MNNG和间接阳性诱变物B(α)P分别对已建立的系统进行了验证,试验结果表明,MNNG以0.32μg-ml-1的剂量诱发的突变频率较溶剂对照组高10.5倍,而B(α)P以1.1μg·ml-1的剂量诱发突变频率较溶剂对照组高12倍,上述试验结果表明,已建立的系统检测已知阳性诱变物结果明显,该系统可用于诱变检测。 质粒经6.6μg·ml-1的喹乙醇处理后,转染Vero细胞,并从细胞中回收质粒转化E.coliMBM7070,试验结果表明,喹乙醇处理组的突变频率明显高于溶剂对照组。本研究又对突变子质粒靶基因进行序列测定,发现喹乙醇引起质粒靶基因核苷酸序列改变主要表现为点突变和连续缺失,且以引发点突变为主。 质粒经1.90、3.75、7.5、15、30μg·ml-1的喹烯酮处理后,将其转染Vero细胞,回收并转化E.coli MBM7070,试验结果表明,喹烯酮处理组的突变子数较溶剂对照没有明显的增加;试验又采用S9将相同浓度的喹烯酮代谢活化后处理质粒,转染Vero细胞,经回收并转化E.coli MBM7070进行突变子筛选,试验结果表明,喹烯酬处理组的突变子数较阴性对照仍然没有明显增加,喹烯酮诱变检测结果阴性。
其他文献
功率图象就是功率随某个物理量的变化趋势,包含着这一过程中某个力的功率的特殊时刻的值或对应实际过程的量,学生从图象获取信息,并对有关信息进加工、整理,理清各变量之间的
该研究在副鸡嗜血杆菌A、C型特异性单克隆抗体的基础上成功地建立了能区分A、C血清型抗体的阻断ELISA(B-ELISA)检测方法,并应用此方法对9种常见病原体阳性血清及多份免疫鸡、人
学习化学的过程中,需要面对的重要问题就是解题.由于学生在做化学题的时候由于理解错误,对相关的化学概念不够明晰等问题,就会导致解题思路出现错误而影响了化学解题效率.本
压强知识与生活实际处处相连,能够解释社会、科技、生活中的好多热点问题,而且很容易与物理上其它模块横挂下连,低层分化,高层次组合,形成能力立意的问题,即能激发学生的学习
漯河一贴堂膏药自本刊推广一年多来,凭借着独特的显著疗效,赢得了可喜的市场份额,伴随着业务量的逐日递增,十平方米的小店已经严重的不能满足现在的经营,以前接待患者就已经
化学是一种重要的化学课程资源之一,善于利用手中的教材,用教材教,利用教材中所呈现的知识为载体,培养学生的综合能力.很多现象和结果都要通过实验来验证.实验课是化学教学的
期刊
在新课程实施的今天,中考化学更加关注社会、贴近生活、联系实际、灵活运用题给信息和化学知识解决生产生活中的新问题、实际问题的考查,与人们日常生产生活关系密切的各种标
由中国纺织工业联合会主办,中国国际贸易促进委员会纺织行业分会和法兰克福展览(香港)有限公司等承办的第十届中国国际纺织纱线(春夏)展览会将于3月27日~29日移师北京全国农业
在化学教学中创造性地教学,培养学生的探究能力和技巧,改变传统的教学模式,以新课程理念触摸初三化学教学,使学生乐而学,发展学生的创新能力,为学生的终身学习而服务. Creat
网络文学的兴起,颠覆了纸质传统写作的话语霸权。给人们的阅读方式、思维方式都带来重要影响。但目前网络文学仍处困境,需寻求一种质的飞跃。笔者从四个方面提醒人们理性关注