自从20世纪20年代初期人类第一次尝试吸入给予胰岛素治疗糖尿病开始,蛋白质的给药方式逐渐出现一种非侵入性给药方式,称之为气道传递。壳聚糖(Chitosan)基纳米载体已经被广泛应用于药物研发当中,以提高药物的疗效。为了提高多肽类药物生物利用率和实现抗纤维化蛋白质药物肺部递送的高效化。我们拟通过体外实验,研究壳聚糖基纳米载体负载抗纤维化msFGFR2c胞外段蛋白检测体外呼吸道上皮转运效率和对成纤维细胞转分化的影响。首先,以msFGFR2c作为包载的目的蛋白。通过离子凝胶方法来制备HTCC/msFGFR2c-NP复合物。马尔文激光粒度仪(Malvern Nano ZS3000)测定纳米粒子的粒径为201±7.5nm及Zeta电位值为6.3±0.27,包封率为27.63±0.47%,载药量为5.82±0.33%。采用原子力显微镜、透射电镜分析复合物纳米粒子形态为光滑的圆形或椭圆形。在pH7.4和pH5.5条件下,采用BCA法检测HTCC/msFGFR2c-NP纳米粒子体外释放曲线,结果显示,在2h后,两种条件下载药纳米粒子的释放效率都在40%以上。24h内的药物释放效率都达到了80%,说明载药纳米粒子具有良好的缓释效果。CCK8法检测结果显示载药纳米颗粒对人肺上皮细胞无毒性。建立Transwell上皮细胞呼吸道药物转运模型,结果显示壳聚糖基纳米载体能够瞬时打开紧密连接,这一作用是通过影响紧密连接蛋白ZO-1来实现的,并且在24h后,TEER值能够恢复90%以上,说明此作用可逆。Western blot免疫印迹结果显示,载药纳米粒子能够抑制由TGF-β引起的MRC-5成纤维细胞(Fb)向肌成纤维细胞(MFb)转分化作用。免疫荧光显示,msFGFR2c胞外段主要与细胞膜表面结合,载药纳米颗粒易于被上皮细胞吸收。最后体内实验结果表明,建立博来霉素诱导的Wistar大鼠肺纤维化模型,从大鼠的体重、肺组织HE及Massion染色、X光结果都表明HTCC/msFGFR2c-NP纳米颗粒对肺纤维化有明显的抑制作用。总的来说,HTCC/msFGFR2c-NP纳米颗粒是肺部给药治疗肺纤维化的潜在药物。