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乳酸片球菌PediococcusacidilacticiDQ2是一株耐高温和耐木质纤维素降解抑制物的乳酸高产菌株。本文从两个角度对P.acidilacticiDQ2进行了改造，使其能够更为适合于木质纤维素生物炼制加工过程。首先，在P.acidilacticiDQ2中建立了外源蛋白表达系统。对常用的乳酸菌表达载体pMG36e进行改造，将其启动子P32更换为来源于P.acidilacticiDQ2的L-乳酸脱氢酶基因的启动子PldhL。并通过新载体pTY36e成功表达了两种不同的外源基因:绿色荧光蛋白基因gfp(Aequoreavictoria)和β-葡萄糖苷酶基因bglA(Bacilluspolymyxa1.794)，其中所表达的胞内β-葡萄糖苷酶活力为4.48U/(g·drycells)。此系统的成功构建为后续对该菌的基因工程改造奠定了基础。其次，对P.acidilacticiDQ2染色体上的D-乳酸脱氢酶基因ldhD进行敲除以生产光学纯的L-乳酸。将热敏型敲除质粒pSET4S上的壮观霉素抗性基因更换成红霉素抗性，并通过新质粒pSET4E构建敲除载体进行ldhD的敲除。结果显示，敲除菌株P.acidilactici△ldhD112所产L-乳酸的光学纯度达到99.88％，并且在其胞内几乎检测不到D-乳酸脱氢酶酶活。由于D-乳酸为此P.acidilacticiDQ2菌株细胞壁肽聚糖的组成成分，对D-乳酸的消除使突变株对万古霉素的抗性急剧的下降。△ldhD112的构建使其所产乳酸具有更加广泛的应用价值，使该菌株具有更大的工业化生产潜力。上述工作对于P.acidilacticiDQ2在生物炼制中的实际应用以及更深层次的性能拓展具有重要的意义。