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目的抑癌基因甲基化与胃癌之间的关系密切,研究发现在胃癌的各个阶段都能检测有基因甲基化的存在,即使癌前病变阶段也能发现。本实验通过检测抑癌基因RUNX3、DAPK启动子区甲基化水平,评估胃癌中此2种抑癌基因的甲基化水平,筛选出可能有利于胃癌早期特异性诊断的肿瘤基因。评价胃癌患者RUNX3、DAPK启动子区甲基化对于其蛋白表达的影响及两者之间的变化与胃癌发生发展的相互关系。方法①收集已确诊的行手术切除的初发胃癌患者54例,获取胃癌组织及癌旁正常组织。②采用酚—氯仿抽提法提取DNA。提取出的DNA继以亚硫酸氢盐、对苯二酚处理,采用甲基化定量特异性PCR(Quantitative Methylation-specific PCR)方法检测上述标本中RUNX3基因和DAPK基因启动子CpG岛甲基化的状况并分析每个基因甲基化程度与临床参数之间的关系。③采用蛋白免疫印记(Western-Blot)方法检测胃癌组织和癌旁组织标本中RUNX3和DAPK基因的蛋白表达水平,进一步探讨基因启动子高甲基化与其蛋白表达之间的关系。结果54例胃癌组织中RUNX3.DAPK基因分别检测77.8%(42/54)、90.7%(49/54)发生了甲基化。相应的癌旁组织中分别检测出38.9%(21/54)、40.7%(22/54)发生了甲基化。两个基因甲基化阳性率在胃癌组织与癌旁正常组织之间的差异均具有统计学意义(P<0.001)。RUNX3基因甲基化阳性率与胃癌的临床分期、组织分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移具有相关性(P<0.05)。DAPK基因甲基化阳性率和胃癌的临床分期、浸润深度、组织分化程度具有相关性(P<0.05)。胃癌组织中RUNX3、DAPK蛋白表达下调／缺失率分别为81.5%(44/54)、94.4%(51/54)显著高于相应的癌旁正常组织12.3%(7/54)、9.3%(5/54)(P<0.001)。胃癌组织中的RUNX3、DAPK基因的高甲基化阳性率伴随着其蛋白表达下调或缺失,而癌旁正常组织与之相反。结论胃癌中RUNX3和DAPK基因启动子异常高甲基化是一个频繁事件,基因启动子高甲基化是导致其蛋白表达缺失的重要机制之一,可能在胃癌的发生发展过程中起到重要作用。胃癌组织中RUNX3和DAPK基因启动子高甲基化可能作为评估胃癌恶性程度和淋巴结转移程度的有效分子生物学指标。