【摘 要】
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目的:探究热休克蛋白70对氧化应激诱导的人髓核干细胞损伤的保护作用,并研究其内在机制。方法:提取人髓核干/祖细胞后,将细胞分为空白对照组、叔丁基过氧化氢处理组以及叔丁基过氧化氢处理+热休克蛋白70激活组。在在热休克蛋白70激活组中,将人髓核干细胞用1μ MTRC051384预处理6h。然后,将热休克蛋白70激活组和对照组均用叔丁基过氧化氢处理12小时。分别测定实验组和对照组的细胞活力、细胞死亡、细
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目的:探究热休克蛋白70对氧化应激诱导的人髓核干细胞损伤的保护作用,并研究其内在机制。方法:提取人髓核干/祖细胞后,将细胞分为空白对照组、叔丁基过氧化氢处理组以及叔丁基过氧化氢处理+热休克蛋白70激活组。在在热休克蛋白70激活组中,将人髓核干细胞用1μ MTRC051384预处理6h。然后,将热休克蛋白70激活组和对照组均用叔丁基过氧化氢处理12小时。分别测定实验组和对照组的细胞活力、细胞死亡、细胞凋亡、细胞活性氧、线粒体活性氧、线粒体膜电位以及细胞衰老表型。此外,使用蛋白印迹实验分析热休克蛋白70、线粒体凋亡途径相关蛋白、衰老相关蛋白和JNK/c-Jun途径相关蛋白的表达,并用实时荧光定量聚合酶链式反应测定HSPA 1A,IL1B,IL6和CXCL8（IL8）等基因的mRNA表达水平。结果:叔丁基过氧化氢剂量依赖性和时间依赖性地损害人髓核干细胞的细胞活力、引起氧化应激反应、降低线粒体膜电位并诱导其凋亡和衰老表型。叔丁基氢过氧化物刺激热休克蛋白70的过表达。此外,热休克蛋白70的激活通过抑制JNK/c-Jun途径显着减轻了叔丁基氢过氧化物诱导的细胞损伤。结论:热休克蛋白70的激活可以减轻叔丁基氢过氧化物诱导的人髓核干细胞损伤,这可能为椎间盘退变的治疗提供新的靶点。
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