泡桐花水提物的毒性试验及体内外抗氧化活性研究

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癌症、衰老或其它疾病大都与过量自由基的产生有关联,研究抗氧化作用可以有效克服过量自由基带来的危害,通过抗氧化作用的研究来寻找有效的抗氧化物质成为目前医药卫生、保健品、化妆品领域研究的热点。中药及其成分因具有抗氧化、抗病毒、提高免疫力且无有害残留、毒副作用小、药源广泛、便于生产等优点,为人们所关注。泡桐花水提物是将泡桐花粗粉经水浸泡提取所得的浸膏进行喷雾干燥而制得的粉末。前期试验表明,泡桐花水提物的抗氧化作用明显,有较好的产业化前景。本文对泡桐花水提物进行了小鼠的急性毒性、大鼠的长期毒性和体内外抗氧化试验,以期为泡桐花水提物的进一步开发利用提供理论依据。本试验测定泡桐花水提物对小鼠的急性毒性,旨在评价泡桐花水提物的急性毒性。取健康小鼠20只,雌、雄各半,以泡桐花水提物的最高浓度(0.05 g/ml)、最大给药容积(0.4 ml/10gb.w.)于24h内灌胃3次,每次间隔6h,给药总量为6.0g/kgb.w.,连续观察7天,并记录动物中毒症状及死亡情况。结果显示,给药后及其观察期间,动物的精神状态良好、毛色光洁、活动自如、呼吸均匀、饮食欲正常、粪便正常、口鼻内无异常分泌物,无动物死亡,观察第7天脱颈椎处死动物,进行病理学检查,检查发现各脏器无充血、出血、水肿或其它病变,亦未发现与给药相关的异常反应。本试验结果表明,泡桐花水提物经口给药短期安全,无明显急性毒副作用,对雌、雄小鼠经口的LD50均大于6.0g/kgb.w.(相当于生药45.0g/kgb.w.),根据毒理学评价标准,属无毒性物质。本试验测定泡桐花水提物的长期毒性,旨在为评价其长期给药的安全性。Wistar大鼠随机分为泡桐花水提物高、中、低剂量组和空白对照组4个组,每组20只,雌雄各半。高、中、低剂量组泡桐花水提物的添加量分别为4%、2%和0.4%(分别相当于推荐剂量的100倍、50和10倍,即每吨饲料中添加40 kg、20 kg、4 kg),连续给药90天;空白对照组以正常饲料饲养。试验期间,每天观察记录大鼠的一般行为表现、中毒及死亡情况。每周称量体重和饲料消耗。给药45天和90天结束时,各组分别收集10只大鼠(雌雄各半)的血液,进行血液学指标和血液生化指标检测。给药45天和90天时,各组取10只大鼠(雌雄各半)进行剖检(与采血同时进行)。称量心、肝、脾、肺、肾、卵巢子宫、睾丸的重量,计算脏器系数;对肝、肾、脾、胃、睾丸、卵巢、十二指肠、结肠等主要脏器进行组织病理学检查。结果显示,1~12周各组大鼠周增重趋势相似。雌雄大鼠大部分时间点三个给药组周增重比空白对照组高,增重与饲料消耗趋势一致。给药后45天和90天,未发现有明显的脏器病变,给药后45天肝脏系数增大,给药后90天肾脏系数增大,给药后45天和90天血液学指标无明显变化。给药45天后,各组生化指标与空白对照组间无显著性差异,给药90天后,谷丙转氨酶显著升高,中剂量组血清白蛋白显著升高,表明大剂量使用药物可能会引起肝肾增大,长期给药可能会引发轻微肝细胞损伤。以上结果表明,每吨饲料中添加4kg泡桐花水提物,对大鼠未有明显的损害作用,但用药剂量过大,长期用药时可能会诱发一定的肝肾损伤。泡桐花体外抗氧化试验使用三种不同的方法(超氧阴离子自由基清除法、羟自由基清除法、抗H202氧化溶血法)测定不同浓度的泡桐花水提物和阳性对照组VC溶液的体外抗氧化效果。结果表明在一定浓度内泡桐花水提物对超氧阴离子自由基及羟自由基有较强的清除作用,抗H202氧化溶血率能力也很强,说明泡桐花水提物在体外有抗氧化能力。试验结果为泡桐花水提物在食品、医药领域进一步开发为抗氧化剂提供理论依据。泡桐花水提物体内抗氧化作用试验旨在为泡桐花水提物在药物和抗氧化保健功能性食品开发上提供理论依据。以泡桐花水提物为试验药物,通过动物实验研究泡桐花水提物的体内抗氧活性,比较空白组小鼠(正常对照)、VC组小鼠与泡桐花水提物低剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠的血清及心、肝、肾、回肠组织的超氧化物歧化酶活力(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶活力(GSH-Px)和丙二醛含量(MDA),对泡桐花水提物的体内抗氧化能力进行测定。结果显示,泡桐花水提物高剂量组能增强心脏、肝脏、回肠组织中的SOD活性,增强心脏、肝脏、回肠组织、血清中的T-AOC活性,增强心脏、肝脏、回肠组织中GSH-Px活性,降低心脏、肝脏、回肠组织、血清中的MDA的含量,显著优于其余各组。以上结果表明泡桐花水提物在体内具有明显的抗氧化作用。
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