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目的:探讨牛磺酸(Tau)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)引起的血管内皮细胞(ECs)凋亡及一氧化氮分泌的影响。 方法:采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株(ECV304)为对象,研究了ox-LDL对内皮细胞凋亡和一氧化氮分泌的影响及牛磺酸的干预作用。实验分为两部分:第一部分研究ox-LDL对内皮细胞的损伤作用。实验分为四组,即空白对照组,ox-LDL处理组(25mg/L,50mg/L和100mg/L);第二部分研究牛磺酸对ox-LDL损伤内皮细胞的保护作用。实验分为6组,即空白对照组、ox-LDL(50mg/L)组及分别加入含有不同浓度的牛磺酸(5、10、20与40mmol/L)的干预组。内皮细胞活性的检测应用MTT法,细胞凋亡的检测应用TUNEL法和流式细胞术,一氧化氮含量的测定应用硝酸还原酶法。 结果:一 ox-LDL对内皮细胞活性及细胞凋亡的影响 1.经不同浓度的ox-LDL作用24小时后,内皮细胞的活性呈浓度依赖性的下降,ox-LDL(25mg/L,50mg/L、100mg/L)处理组细胞活性分别为对照组的81%(P<0.05)、72%(P<0.01)、59%(P<0.01)。 2.经不同浓度的ox-LDL作用24小时后,内皮细胞的凋亡率呈浓度依赖性的增加,ox-LDL(25mg/L,50mg/L、100mg/L)处理组内皮细胞凋亡率分别为空白对照组的11.7倍(P<0.01)、16.9倍(P<0.01)、22.3倍(P<0.01)。 二 牛磺酸对ox-LDL引起的血管内皮细胞凋亡及一氧化氮合成的影响 1.牛磺酸对ox-LDL引起的血管内皮细胞凋亡的影响 经ox-LDL(50mg/L)处理24小时后,细胞凋亡率明显上升(细胞凋亡率为25.50±2.10%versus 1.37±0.15% P<0.01)。牛磺酸则在一定范围内呈浓度依赖性的拮抗ox-LDL(50mg/L)所致的内皮细胞的凋亡,流式细胞术检测结果示:5、10、20与40mmol/L牛磺酸使内皮细胞的凋亡率分别下降为ox-LDL(50mg/L)处理组的89%(P<0.05)、65%(P<0.01)、49%(P<0.01)、44%(P<0.01)。应用TUNNEL