为建立高效的羽衣甘蓝游离小孢子培养体系，加快育种材料纯化，以10个羽衣甘蓝杂交种为试材，采用游离小孢子培养方法，研究了培养基和培养条件对胚状体发生、发育和再生植株的影响，探讨了小孢子植株倍性鉴定方法及加倍技术，对获得的双单倍体植株的园艺学性状进行了鉴定，获得了下列试验结果。 1．不同基因型材料适宜取样花蕾的大小有一定的差异。多数品种适宜取蕾长度为3.0～4.5mm；花瓣与花药长度之比为4／5～7／6，选择圆形小孢子占绝大多数的花蕾进行游离小孢子培养较适合。 2．基因型是影响羽衣甘蓝小孢子胚诱导的关键因素之一。在10个供试基因型材料中，有7个基因型的胚状体诱导获得成功。小孢子胚诱导率最高的品种“Y009”出胚率达0.88胚·蕾^-1。 3．植物生长调节剂对小孢子胚发生及发育有一定影响。6-BA对诱导小孢子胚有促进作用，适宜浓度为0.2mg·L^-1；NAA抑制小孢子胚状体发生，但能促进其发育，提高正常胚比例；2，4-D对诱导胚状体发生有较强的抑制作用；6-BA和NAA协调作用能显著提高胚状体诱导率，有利于萌发胚和子叶形胚的发生，适宜的浓度比为1：1或2：1。 4．琼脂糖和活性炭对小孢子胚发生和发育有促进作用，对难成胚基因型的作用效果尤为显著，适宜添加量为每皿添加0.5g·L^-1的琼脂糖和10g·L^-1的活性炭混合液100μL。 5．花蕾4℃低温预处理能提高小孢子胚诱导率。该影响在“Y009”上表现不显著，但可以暂时保存材料而不降低培养效果。 6．游离小孢子33℃高温预处理，可以改变小孢子发育方向，使其由配子体发育途径转向孢子体发育途径，并使小孢子维持较高的活细胞频率，促进细胞分裂和胚状体发生。处理时间以24h为宜。 7．盛花期花蕾样品成胚率高，其次为初花期。末花期花蕾样品进行游离小孢子培养未获得胚状体。 8．培养基最适的蔗糖浓度为13％。 9．小孢子胚成苗能力与胚状体发育时期有关。萌发胚、子叶形胚的成苗率较高，分别为85.71％和56.25％；鱼雷形胚成苗率为28.57％；心形胚和球形胚成苗率仅为9.76％；畸形胚不能成苗。 10．胚状体成苗培养以琼脂含量为1.0％的MS培养基为宜。 11．活性炭对子叶形胚成苗无明显作用，但有利于鱼雷形胚成苗，适宜的活性炭添加量为100mg·L^-1。