新型有机光敏剂PBDB-T诱导口腔鳞癌免疫原性细胞死亡的实验研究

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[目的]探究新型有机光敏剂PBDB-T诱导口腔鳞癌免疫原性细胞死亡的作用和机制。[方法]利用纳米共沉淀法将PBDB-T制备为纳米粒子(PBDB-T NPs),通过透射电子显微镜和动态光散射仪分析其形貌和粒径。使用紫外-可见-近红外分光光度计分析近红外吸收光谱,荧光分光光度计分析荧光发射光谱。将PBDB-T NPs分散于模拟生理体液中评估其生物稳定性。660nm激光照射检测其光热性能及光热稳定性。使用CCK-8法、活死细胞染色在体外实验中评估PBDB-T NPs光热效应的抑瘤作用。构建口腔鳞癌移植瘤小鼠动物模型,在体内实验中评估PBDBT NPs的抑瘤效果。调整纳米粒子浓度、激光照射功率,评估PBDB-T NPs光热性能的可控性。设计PBDB-T NPs光热治疗(Photothermal therapy,PTT)程序,精确控制治疗温度,评估程序性温和PTT的光热杀伤作用,评估其免疫原性并探讨机制。构建荷瘤小鼠动物模型,评估PBDB-T NPs PTT的免疫原性及免疫激活作用。[结果]成功制备PBDB-T NPs,纳米粒子呈粒径一致(约165nm),分散均匀的球型,在模拟生理体液内具有良好的稳定性。PBDB-T NPs近红外吸收峰位于631nm,荧光发射峰位于691nm。PBDB-T NPs具有>40%的光热转换效率。体内外实验证明PBDB-T NPs具有优异的抗肿瘤活性及良好的生物安全性。可通过调整PBDB-T NPs浓度和激光照射功率控制治疗温度。严格设计激光照射程序,可将治疗温度精确控制于40℃-45℃之间。体外实验证实程序性温和PTT具有优异的抗肿瘤杀伤作用,PTT为42℃时,程序治疗3次可使>60%的肿瘤细胞失去活性。同时程序性温和PTT可显著诱导肿瘤细胞免疫原性细胞死亡,上调损伤相关分子模式(钙网蛋白、高迁移率族蛋白B1)的释放。PTT为42℃时,程序治疗3次可实现最佳损伤相关分子模式释放。体内实验证明程序性温和PTT具有最佳免疫激活作用,可显著抑制肿瘤生长。[结论]成功制备新型有机纳米光敏材料PBDB-T NPs,其具有良好的生物相容性及安全性,具有稳定、高效的光热转换效率,可实现体内外优异抑瘤作用。通过程序性治疗可实现温和PTT,获得高效杀伤肿瘤及最佳激活免疫功能。
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